棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ基因的表达及鉴定

摘要

通过PCR扩增的方法获得了棉铃虫普通气味结合蛋白Ⅱ(GOBP2-Harm)基因成熟蛋白阅读框序列,构建了GOBP2-Harm原核表达载体pGEX/GOBP2-Harm,并成功地在大肠杆菌中进行了表达.SDS-PAGE分析表明:大部分GOBP2-Harm重组蛋白形成不溶性的包涵体,超声波破碎大肠杆菌细胞后,在上清液中能检测到少量的可溶性GOBP2-Harm蛋白.为了获得大量纯化的可溶性目的蛋白,我们对包涵体进行了溶解和重折叠,并通过亲合层析法进行了纯化.纯化产物能与多音天蚕(Antheraea polyphemus)GOBP抗血清发生交叉反应,证实表达产物属于昆虫普通气味结合蛋白.