莪芪抗瘤方剂对白血病HL-60细胞凋亡的作用及机理研究

摘要

目的:研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡影响,并探讨凋亡发生的可能机制.方法:通过血清药理学方法,选择10%浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24、48、72、96 h后,应用荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测凋亡峰(亚二倍体峰),用Fura-2荧光负载方法测定细胞内Ca2+浓度的变化;比色法检测凋亡相关基因Caspase-3活性变化.结果:10%浓度的含药血清处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,膜起泡,核断裂及形成凋亡小体等,以72h最为明显;可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群,这群细胞的凋亡百分率随时间的递增而增加.10%浓度的含药血清处理组的细胞内Ca2+浓度也明显高于对照组(P＜0.01),Caspase-3基因活性明显高于对照组相(P＜0.01,P＜0.05).结论:莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡,这种变化可能与细胞内Ca2+水平上调,Caspase-3活性增强有关.