盐胁迫下盐地碱蓬叶片液泡膜H+-ATPase H 亚基的克隆与表达分析

摘要

利用EST随机挑取克隆测序的方法从盐地碱蓬叶片cDNA文库中分离得到了盐地碱蓬V-H+-ATPase H亚基cDNA序列,并进行了H、c亚基基因表达及V-H+-ATPase活性分析.结果表明,H亚基基因全长1 969 bp,包括100bp的5′-非编码区和471 bp的3′-非编码区.开放阅读框为1 398 bp,编码465个氨基酸残基,分子量约52.8 kD.Northern杂交分析表明盐胁迫明显诱导了H亚基表达,而且盐胁迫下H、c亚基及V-H+-ATPase活性存在协同作用.这些结果表明盐胁迫下H和c亚基基因上调及V-H+-ATPase活性的增加为Na+区隔化到液泡中提供了质子驱动力.