棉花纤维伸长期与次生壁增厚期蛋白质组比较

摘要

以陆地棉徐州142为材料,比较了3种不同棉花纤维蛋白质提取方法;利用双向电泳技术比较棉花纤维伸长及初生壁形成期(10 DPA)和次生壁增厚期(25 DPA)蛋白质组的变化;利用PDQuest软件分析各个差异蛋白在10 DPA和25 DPA棉花纤维中的相对表达量,选取质量好、实验重复性高的蛋白质点15个进行MALDI-TOF MS鉴定;根据日的蛋白核苷酸序列设计特异引物,对5种差异蛋白进行半定量RT-PCR分析.结果表明,利用饱和酚一甲醇醋酸铵法提取的棉花纤维蛋白,其蛋白含量较高,且SDS-PAGE电泳条带清晰;进行MALDI-TOF MS鉴定的15个差异蛋白,于NCBI上进行数据查询,分别属于F-box家族蛋自、肌动蛋白、β-微管蛋白、F,-ATP合成酶、ATP酶R亚基、膜联蛋白、磷酸甘油酸酯激酶I、胞质苹果酸脱氢酶、S-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶、谷氨酞胺合成酶、Cu-Zn超氧化物歧化酶、profifn,4-香豆酸辅酶A连接酶等.查询结果表明,上述蛋白参与能量代谢、碳代谢、细胞周期调控和发育等.