K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备

摘要

利用PCR技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的K88菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到E.coli表达载体pET28a(+)中,构建了该基因的原核表达载体p8828,导入E.coli BL21(DE3),得到工程菌株.SDS-PAGE分析结果显示,经IPTG诱导,该亚基基因高效表达出重组K88菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的30%.用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备K88菌毛蛋白亚基的抗血清.免疫学分析表明,用此重组蛋白制备的抗血清能与标准的仔猪黄痢野生强毒株发生明显的抗原抗体反应.