利用高效农杆菌遗传转化系统将ACP反义基因片段导入油菜

摘要

通过对已有的油菜农杆菌遗传转化体系的改进,建立了一种利用农杆菌感染油菜子叶柄的高效遗传转化方法,经过农杆菌感染的子叶柄在含有6-BA 2.0mg/L,IBA 0.15mg/L,AgNO3 3.5mg/L的MS培养基上由卡那霉素抗性愈伤组织分化出抗性幼苗的频率达到12.28%.利用已经构建的含有油菜Napin启动子加上反义ACP脱饱和酶第一外显子、内含子的基因片段的植物双元表达载体pNACP,将该反义ACP基因片段转入油菜"沪油15";PCR和GUS染色结果表明抗性植株中有60%的植株含有导入的目的基因.这为油菜籽脂肪酸遗传改良提供了一种新的方法.