正交试验法优化稗属植物ISSR-PCR反应体系

摘要

利用正交设计方法,对稗属植物ISSR-PCR反应体系的4个因素(Taq DNA聚合酶、引物、dNTPs和模板DNA)在4个水平上进行优化,建立了稗属植物ISSR-PCR的最佳反应体系(20 μL):Taq DNA聚合酶0.5U、引物0.1 μmol/L、dNTPs 200 μmol/L、DNA模板150 ng.共筛选出9条适合稗属植物ISSR-PCR的引物,并确定了每条引物的最适退火温度,可为后续利用ISSR技术开展稗属植物鉴定和多样性研究提供技术支持.