单酶法RT-PCR检测马铃薯纺锤块茎类病毒

摘要

根据Taq酶既有聚合酶活性又有反转录酶活性的特点,探索了只在Taq酶单独作用下完成RT-PCR反应的条件,以达到对马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTV)的快速检测.结果表明,反转录阶段退火温度在37 ℃、循环数不少于10次的情况下,PCR扩增能得到一条相关特异带.经过嵌合式PCR证明,这条带为PSTV的特异带.与其他检测方法相比,用单酶法RT-PCR检测PSTV步骤简单,成本低廉.