人参皂苷Rg1对辐射致肠IEC-6细胞损伤保护作用的体外实验

摘要

目的 研究中药单体人参皂苷Rg1对辐射后EC-6细胞的影响及在PI3K/AKT通路的作用机制.方法 取大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6传代培养,设空白组、模型组、中药(人参皂苷)组及中药+抑制剂(LY294002)组,除空白组外,其余各组采用60Co-γy射线照射细胞,剂量为4 Gy.采用CCK8法检测照射后12 h、24 h、36 h时各组细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞生存、凋亡情况,Western blot法检测细胞磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated AKT,p-AKT)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 Associated X protein,Bax)的表达,并比较Bax/Bcl-2比值差异.结果 CCK-8结果表明,照射后12h、24 h模型组及中药+抑制剂组增殖活力低于空白组和中药组(P＜0.05).凋亡检测结果显示,照射后各照射组细胞均出现存活率下降、凋亡率升高的趋势;模型组、中药+抑制剂组细胞在12h、24 h存活率均低于空白组和中药组(P＜0.05);至36 h,模型组、中药组与空白组生存率及凋亡率均相似(P＞0.05),中药+抑制剂细胞存活率与其他3组相当(P＞0.05),但凋亡率显著高于其他3组(P＜0.05).Western blot法检测结果显示,模型组p-AKT、Bcl-2显著低于中药组和空白组(P＜0.05),模型组p-AKT显著高于中药+抑制剂组(P＜0.05);模型组和中药+抑制剂组Bax及Bax/Bcl-2比值显著高于空白组和中药组(P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1能够有效促进辐射后肠IEC-6细胞存活、抑制凋亡,其作用机制可能与其促进PI3K/AKT相关因子表达有关.