抗CD133/CD3双特异性抗体介导的细胞因子诱导杀伤细胞体外杀伤CD133阳性肿瘤细胞研究

摘要

目的 比较抗CD133/CD3双特异性抗体介导的细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)与普通CIK对胰腺癌、胃癌和卵巢癌等细胞系的杀伤作用.方法 利用杂交瘤技术制备鼠抗人CD133单克隆抗体,用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测腹水效价;经过蛋白G亲和层析法纯化得到CD133抗体,在温和的条件下与鼠抗人CD3单抗进行化学偶联,制备抗CD133和抗CD3的双特异性抗体;CCK8试剂盒检测CIK和双特异性抗体介导的CIK杀伤肿瘤细胞系.结果 收获腹水效价为1∶50000,通过标准曲线计算出CD133单抗的浓度为3.2 mg/ml;成功构建了抗CD133/CD3双功能特异性抗体介导的CIK;在相同的效靶比条件下,抗CD 133/CD3介导的CIK对表达CD133的胰腺癌细胞系SW1990、胃癌细胞系SGC7901和卵巢癌细胞系A2780有更强的杀伤作用,与单纯CIK相比有显著差异,在效靶浓度为20:1时,抗CDI33/CD3双特异性抗体介导CIK细胞较普通CIK对SW1990细胞株杀伤率提高了30.99％,对SGC7901细胞株杀伤率提高了24.42％(P＜0.05).结论 抗CD133/CD3双功能抗体可以显著改善CIK对CD133阳性肿瘤细胞的杀伤作用.