Etude de la regulation de l'expression du gene de la peripherine au cours de la differenciation neuronale (French and English text).

摘要

Nous avons étudié les mécanismes transcriptionnels responsables de l'expression du gène de la périphérine afin, d'une part, de mieux comprendre le processus qui permet au gène de s'exprimer de façon histospécifique et d'autre part, d'identifier des facteurs de transcription importants pour l'induction de l'expression du gène en réponse à des signaux extracellulaires.; La périphérine est une protéine de la famille des filaments intermédiaires (FI). La périphérine est un modèle intéressant pour l'étude des mécanismes moléculaires qui régissent la spécificit tissulaire ainsi que le déclenchement de l'expression génétique au cours du développement du système nerveux et, qui sont responsables du maintien de l'intégrité du système nerveux. Pour comprendre comment la transcription du gène de la périphérine est régie, nous avons tout d'abord caractérisé un élément de régulation du promoteur du gène. Puis, dans un deuxième temps, nous sommes allés à la recherche d'éléments de régulation intragéniques susceptibles de moduler l'augmentation des niveaux d'expression du gène de la périphérine en réponse au facteur de croissance du tissu nerveux (NGF) et de l'interleukine-6 (IL-6).; Nous avons de caractérisé un élément de régulation, PER3, localisé dans la région proximale du promoteur du gène. Cet élément est un activateur transcriptionnel fort et lie le facteur de transcription Sp-1. De fait, PER3 est responsable de 80% de l'activit transcriptionnelle du promoteur. Parallèlement, l'utilisation de la DNase I in vivo nous a permis de cartographier trois sites hypersensibles à l'intérieur du gène dans l'intron 1 (PRi-1), l'intron 3 (PRi-3) et l'intron 6 (PRi-6). Le site PRi-1 revêt un attrait particulier pour notre étude. D'une part, parce que, de façon générale, les sites hypersensibles à la DNase I coïncident avec des séquences régulatrices capables d'interagir avec des facteurs de transcription et, d'autre part, parce que ce site pourrait intervenir dans l'induction de l'expression du gène de la périphérine en réponse au NGF et à l'IL-6. L'analyse de ce site a conduit à l'identification d'un élément de régulation liant un complexe protéique qui possède des caractéristiques interéssantes. Premièrement, la protéine associée à ce complexe, p100, a une masse moléculaire d'environ 100 kDa et, deuxièmement, n'est détectable que dans les cellules qui expriment le gène de la périphérine. Finalement, l'activité de liaison à-l'ADN de p100 semble être affectée par le NGF et l'IL-6 car elle n'est pas détectée dans les cellules traitées au NGF ou à l'IL-6. (Abstract shortened by UMI.)