Etude sur l'inhibition du phenotype des gliomes malins par la voie de signalisation du TGF-beta.

摘要

Les gliomes malins proliferent d'une maniere tres anarchique et elles s'infiltrent dans le parenchyme cerebral. Plusieurs facteurs de croissance, tels que le Transforming Growth Factor Beta (TGF-beta), sont surexprimes dans les gliomes malins. La voie de signalisation du TGF-beta joue un role cle dans la regulation des mecanismes lies au metabolisme et a la proliferation cellulaire. L'objectif principal de cette etude est d'evaluer les effets de l'inhibition de la voie de signalisation du TGF-beta sur le phenotype des gliomes malins. Deux methodes ont ete utilisees pour inhiber la voie du TGF-beta. La premiere est un traitement a la chloroquine, un agent alcalinisant lysosomotropique, qui module a la hausse le pH du Trans Golgi Network (TGN )/endosome. Cet agent inhibe la furine, une protease necessaire a la maturation du TGF-beta, ainsi que la metalloproteases-2 (MMP-2) qui permet la liberation du TGF-beta de la matrice extracellulaire (MEC). La deuxieme methode est un traitement avec l'Avasimibe(TM), un agent qui inhibe l'Acyl-CoA-Acetyltransferase (ACAT) demontree comme etant active par le TGF-beta. Les effets de ces deux agents ont ete testes sur la secretion de TGF-beta, sur le metabolisme et la proliferation cellulaire de la lignee de gliomes murins F98. Par l'immunobuvardage de type Western blot, notre etude a revele la presence de la forme immature de TGF-beta1 et de Latency Associated Peptide (LAP) dans le surnageant de la lignee de gliomes murins F98. Par le test Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA), l'etude a indique que la chloroquine et l'Avasimibe(TM) diminuent de 85 +/- 3 % et 65 +/- 1 % la concentration de TGF-beta1 mature secretee dans le surnageant cellulaire. Les essais WST-1 et BrdU ont montre que des expositions de 24 h et 48 h a la chloroquine et l'Avasimibe(TM) diminuent significativement de plus de 74 +/- 9 % et 86 +/- 2 % % le metabolisme et la proliferation cellulaire. La zymographie pousse a croire que les effets de chloroquine etaient associes a une inhibition de 75 +/- 1 % de l'activite de la MMP-2 en 48 h. L'ajout de la chloroquine et de 1'Avasimibe(TM) pourrait etre benefique au traitement standard des gliomes malins en reduisant leur phenotype.;Mots-cles : gliomes, TGF-beta, chloroquine, Avasimibe(TM), metabolisme, proliferation.