慢性饮用白酒大鼠经序贯性注射油酸内毒素诱导肺损伤的实验研究

摘要

目的:随着经济发展，我国酗酒率逐渐增高，白酒是酒精消耗量最高的酒精饮料。大型临床调查显示慢性酗酒史可明显增加ALI/ARDS的发生易感率及疾病严重程度。本研究的主要目的为通过模拟大鼠自由饮用白酒，建立慢性饮酒动物模型，并给予序贯性注射油酸脂多糖，诱导急性肺损伤模型，观察慢性饮酒对急性肺损伤时GSH、MDA的影响和肺泡上皮标志物水平的改变，以及中药黄芪注射液的保护作用。 方法:以20％白酒作为唯一饮用液体来源，喂养大鼠6周，复制慢性饮酒大鼠模型。6周后采用序贯性注射油酸及脂多糖，诱导二次打击肺损伤模型，观察慢性饮酒肺损伤后PaO2、肺W/D值以及BALF中蛋白水平的改变，及肝肺组织中GSH、MDA水平的变化，并检测肺组织及BALF中AQP5、SP-A及AQP4蛋白水平的变化，采用免疫组化技术定位AQP5、AQP4在肺组织的表达。同时给予肺损伤大鼠经腹腔注射黄芪注射液，观察上述指标的变化，评价该药对饮酒及非饮酒大鼠肺损伤的保护作用。 结果:1.肺损伤大鼠PaO2下降，肺W/D值以及BALF中蛋白水平升高，饮酒损伤组改变较饮水损伤组明显。2.慢性饮酒大鼠肝脏GSH水平降低，MDA水平增高。肺组织GSH水平降低，与肝脏GSH水平有相关性，但肺组织MDA无明显升高。3.肺损伤大鼠肝肺GSH明显减少，MDA水平升高；肺组织及BALF中AQP5表达减少，肺组织SP-A水平下降，western blot技术未能在肺组织中检测到AQP4蛋白水平，免疫组化显示AQP4存在于肺组织细支气管柱状上皮细胞，但肺损伤未造成AQP4的改变。4.黄芪应用后，上述指标明显改善，饮酒组各项指标明显改善。 讨论:1.慢性饮用国产白酒6周，大鼠体重及行为异常，酗酒模型复制成功。2.油酸内毒素序贯性注射导致大鼠PaO2下降，肺W/D值以及BALF中蛋白水平升高，肺损伤模型复制成功。同时饮酒大鼠肺损伤程度重于饮水组大鼠。3.慢性酗酒导致大鼠肝脏重要抗氧化物GSH水平降低，MDA水平升高，同时肺组织GSH水平下降，并与肝GSH水平呈相关性，考虑为肝脏向循环系统产生并分泌GSH减少，肺摄取减少，在受到致伤因素侵袭时，肺损伤程度加重。4.急性肺损伤时，肺泡I型上皮细胞和II型上皮细胞表面标志物AQP5及SP-A在肺组织表达明显减少，慢性饮酒大鼠改变更为明显，提示肺损伤时两种肺泡上皮细胞均明显受损。5.黄芪可明显改善肺损伤时大鼠抗氧化能力下降，对大鼠尤其是饮酒大鼠在受到致伤因素时有保护作用，表明黄芪能抑制自由基引起的过氧化反应,减少自由基对生物膜的损害,从而保护机体，在油酸脂多糖致肺损伤起到一定的治疗作用。