重度失血性休克延迟复苏及口服补液对免疫功能影响的实验研究

摘要

目的：1.建立Beagle犬40％血容量失血后早期口服补液的动物模型：2.研究延迟复苏对犬40％血容量失血后细胞免疫功能的影响；3。研究早期口服葡萄糖电解质溶液，在预防延迟复苏所致免疫功能障碍中的作用及可能机制。
　　 方法：Beagle犬14只，动物于40％血容量失血实验前1天，实施无菌颈动脉、颈外静脉置管及胃造口置管术。次口，按全身血容量的40％于1/2h放血完毕，随机分为延迟复苏组和口服补液组。延迟复苏组24小时内无治疗：口服补液组于放血后30min经胃输注3倍失血总量的GES液(前8小时输注1/2，后16小时输注1/2)。两组犬于失血后24h开始静脉液体复苏，输注3倍于失血总量乳酸林格液，48h后输注生理需要量。72h处死动物。采集0h、1h、4h、8h、24h、48h、72h的外周静脉血，采用流式细胞分析仪检测外周血淋巴细胞凋亡率、CD3+/CD4+和CD3+/CD8+T淋巴细胞的百分率，并计算CD4+/CD8+比值；EL1SA法检测血浆TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和淋巴细胞增值率水平。
　　 结果：1.CD4+和CD8+T淋巴细胞比例的变化：伤后两组CD4+T淋巴细胞百分比均下降，4h降至最低点，延迟复苏组4h较伤前降低(P<0.05)，48h、72h低于几服补液组(P<0.05)，口服补液组72h较伤前升高(P<0.05)；伤后各时间点两组C D8+T淋巴细胞比例均较伤前升高(P<0.01)，延迟复苏组24h、48h、72h显著高于口服补液组(P<0.01)；两组的CD4+/CD8+比值在伤后各时间点均较伤前降低(P<0.01)，延迟复苏组24h、48h利72h低于几服补液组(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞凋亡率和增殖率的变化：伤后两组凋亡率均先降低，于4h降至最低值；几服补液组4h较伤前降低(P<0.01)，延迟复苏组4h、48h较伤前降低(P<0.05)，4h、48h、72h低于口服补液组(P<0.05)；40％血容量失血后，延迟复苏组24h淋巴细胞增殖率低于伤前(P<0.05)，低于口服补液组(P<0.05)。3.细胞因子的变化：①血浆IFN-γ水平口服补液组1h、4h、48h较伤前降低(P<0.05)，延迟复苏组伤后各时间点IFN-γ水半均较伤前降低(P<0.05)，8h、24h低于口服补液组(P<0.01)。②口服补液组IL-4水平较伤前无差异(P>0.05)，延迟复苏组4h升高至峰值，1h、4h、8h均较伤前升高(P<0.05)，1h、24h、48h时间点均高十几服补液组(P<0.05)。③IFN-γ/IL-4比值伤后均逐渐降低，4h降至最低值，两组伤后各时间点均较伤前降低(P<0.05)，1h、4h、24h、72h延迟复苏组低于口服补液组(P<0.05)。④IL-10水平均较伤前升高，4h达峰值之后开始降低；口服补液组1h、4h、8h、72h较伤前升高(P<0.05)，延迟复苏组1h、4h、8h、48h较伤前升高(P<0.05)，但1h、4h、72h均低于口服补液组(P<0.05)。⑤伤后TNF-α均急剧升高，于1h达峰值后降低，8h降全伤前水平；口服补液组伤后1h、4h均较伤前显著升高(P<0.05)，延迟复苏组伤后1h、48h、72h均较伤前显著升高(P<0.01)，24h、48h、72h均高于口服补液组(P<0.05)。⑥伤后血浆IL-2水平较伤前下降，1h降至最低后缓慢升高；口服补液组1h、4h较伤前降低(P<0.05)，延迟复苏组伤后各时间点均较伤前显著降低(P<0.05)，1h、4h、8h低于口服补液组(P<0.05)。
　　 结论：1.失血性休克延迟复苏导致T淋巴细胞功能持续处于抑制状态，细胞免疫功能紊乱，Th1和Th2失衡，Th1向Th2漂移；机体全身炎症反应失去控制，促炎/抗炎平衡失衡可能是其重要原国之一；2.早期口服补液可以提高T淋巴细胞增殖能力，改善细胞免疫功能紊乱，减轻Th1/Th2漂移，改善休克后免疫功能抑制状态，这可能与早期口服补液改善失血性休克病情，减轻全身炎症反应，调节促炎/抗炎反应平衡有关。

目录

文摘

英文文摘

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声明

前言

一.材料与方法

1 主要试剂

2.主要仪器

3.模型制作及分组

4.指标检测方法

5.统计学处理

二.实验结果

讨论

结论

参考文献

文献综述：TH17细胞的研究进展

攻读硕士学位期间发表论文及参编专著情况

致谢