我国甜橙上柑橘衰退病毒CPG/Hinf Ⅰ RFLP组群初步研究

摘要

本研究针对中国开展MSCP遇到的困难，通过单蚜传毒对典型的强弱毒株系进行分离、纯化，考察不同CPG/HinfⅠRFLP组群的蚜传特性，推测田间甜橙上橘蚜对不同组群CTV的传播能力；并籍RFLP和单链构象多态性(SSCP)分析手段考察CPG在单蚜传毒前后的异同，检验单蚜传毒的分离纯化效果；最后测定单一CPG/HinfⅠRFLP组群蚜传分离株的CPG和p23基因核酸序列，明确不同组群分离株以及典型CTV株系间在这两个基因上的同源性关系，为MSCP技术的应用积累蚜传资料和弱毒蚜传分离株。

目录

文摘

英文文摘

第1章文献综述

1.1 CTV研究历史与为害

1.1.1柑橘衰退病的历史

1.1.2 CTV对甜橙生产的为害

1.2 CTV基因组学

1.3 CTV株系与类群的鉴定方法

1.3.1用指示植物划分不同CTV株系

1.3.2根据CTV相关蛋白区分不同株系的方法

1.3.3根据CTV核酸区分不同株系的方法

1.4 CTV的蚜传特性

1.4.1影响蚜传效率的因素

1.4.2单蚜传对CTV混合株系的分离作用

1.5防治策略

第2章引言

第3章材料与方法

3.1供试材料

3.1.1 CTV来源及采集

3.1.2供试昆虫

3.1.3供试苗木

3.1.4化学试剂

3.1.5实验仪器

3.1.6常用储备液及缓冲液

3.2试验方法

3.2.1直接组织点免疫(DTBIA)筛选

3.2.2毒源保存

3.2.3总核酸提取

3.2.4 RT-PCR

3.2.5 RFLP分析

3.2.6 SSCP分析

3.2.7单蚜传毒

3.2.8指示植物鉴定

3.2.9序列分析

3.2.10田间甜橙茎陷点症状调查

第4章结果与分析

4.1中国甜橙主产区田间CTVCPG/Hinf I RFLP组群调查

4.1.1用DTBIA方法筛选感染CTV的田间甜橙样品

4.1.2 CTV CPG的RT-PCR合成

4.1.3中国甜橙主产区CTV CPG/Hinf I RFLP组群构成初步分析

4.1.3中国CTV CPG/Hinf I RFLP组群与甜橙茎陷点症状间相关性的初步研究

4.2不同CPG/Hinf I RFLP组群CTV的单蚜传毒分析

4.2.1四种CTV毒源甜橙到甜橙的单蚜传毒阳性检出情况

4.2.2 CPG/Hinf I RFLP组群在单蚜传毒前后的异同

4.2.3不同CPG/Hinf I RFLP组群SSCP模式在单蚜传毒前后的异同

4.2.4单一CPG/Hinf I RFLP组群CTV在CPG和p23两个基因的序列分析

第5章讨论与结论

5.1 DTBIA方法筛选感染CTV的田间甜橙样品

5.2中国甜橙主产区流行的CTV CPG/Hinf I RFLP主要组群初步分析

5.3中国甜橙产区CPG/Hinf I RFLP主要组群与甜橙茎陷点症状间相关性的初步研究

5.4不同CPG/Hinf I RFLP组群CTV的单蚜传毒分析

5.5蚜传前后CPG SSCP分析与CPG/Hinf I RFLP组群分析的比较

5.6单一CPG/Hinf I RFLP组群CTV的CPG和p23基因序列分析

参考文献

附录1：8个CTV单蚜传毒分离株CP基因测序结果

附录2：8个CTV单蚜传毒分离株p23基因基因测序结果

发表论文与参加科研情况

致谢