雷公藤多甙对胶原免疫性关节炎及佐剂性关节炎影响的比较研究

摘要

目的:该研究采用免疫病理学指标来研究胶原免疫性关节炎和佐剂性关节炎两种动物模型发病机制的异同,并选用雷公藤多甙作为工具药,观察中药雷公藤多甙对两种类风湿性关节炎(Arthritis Rheumatoid,RA)模型的作用.材料和方法:选用SD雄性大鼠随机分组(见实验部分).对胶原免疫性关节炎(Collagen induced Arthritis,CIA)模型组、CIA雷公藤多甙治疗组大鼠,将Ⅱ型胶原与等量Freund's完全佐剂混合,充分乳化后,动物右后足跖皮下注射,100ug/足.对佐剂性关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)模型组、AA雷公藤多甙治疗组大鼠右后足跖皮内注射Freund's完全佐剂100ul/足致炎.造模同日对雷公藤多甙治疗组给予雷公藤多甙灌胃,给药剂量根据成人用量1mg/人/kg换算而得大鼠给药量8.75mg/kg/天.给药四周,停药三周后处死动物取材.用病理学方法观察动物关节病理形态变化,用ELISA方法检测血清中抗CⅡ抗体,用免疫荧光染色和流式细胞术检测全血、Peyer's Patch(派伊尔结)和脾脏中T细胞亚群,用MTT法测定脾脏细胞中淋巴细胞的增殖功能,用免疫组织化学染色法观察关节局部TNF-α,IL-6,COX-2及NF-κ B的表达.结论:1.CIA模型和AA模型大鼠体内免疫功能被激活,两种模型中派伊尔结数量增多,可认为是粘膜局部免疫亢进的表现;CIA和AA模型大鼠关节都可见高水平的炎症介质表达,出现关节局部炎症反应,说明两种模型关节病变局部存在炎症反应和细胞因子的调节作用.CIA模型大鼠可见软骨、骨质的破坏,血管翳形成;AA大鼠血管翳形成不明显,未见骨质破坏.B细胞所介导的体液免疫在AA发病中并不起主导作用;同时AA大鼠CD4<'+>T细胞数量较正常组减少,导致CD4<'+>/CD8<'+>比例失调,T细胞亚群分布紊乱,所导致的细胞免疫失调是AA大鼠免疫功能异常的重要特征之一.CD4<'+>T细胞是CIA的主要调节因素,CD4<'+>/CD8<'+>比例明显增高,CIA大鼠血清中表达大量的抗Ⅱ型胶原抗体,体液免疫和细胞免疫功能的异常为CIA的发病基础.从该研究得到的结果来看,CIA与AA相比,CIA更接近RA的病理变化,虽然CIA不能完全反映RA的发病机制,但其的发病机制更能表现RA为自身免疫性疾病的特点,体内细胞免疫和体液免疫变化与RA相似,AA与CIA相比尚具有一定的局限性,相较而言,CIA更适合作为研究RA的模型.2.雷公藤多甙通过抑制细胞免疫,减少致炎淋巴因子的产生,从而减轻炎症反应;它同时可以抑制体液免疫,减少自身抗体的生成,从而对CIA大鼠免疫功能以及炎症反应有明显的抑制作用.雷公藤多甙对T淋巴细胞亚群有非选择性非平衡性的抑制作用,使患者机体内存在的免疫细胞亚群之间的病理性平衡产生改变,纠正免疫系统紊乱.3.雷公藤多甙可以调节AA大鼠体内T淋巴细胞亚群比例紊乱,通过抑制细胞免疫,减少细胞的浸润和致炎淋巴因子的产生,从而减轻炎症反应.

目录

文献综述1 类风湿性关节炎的发病机制及实验模型研究

文献综述2 雷公藤治疗类风湿性关节炎的作用机理及临床研究进展

前言

第一部分 CIA模型与AA模型的对比研究

材料和方法

1材料

2方法

实验结果

讨论

第二部分 雷公藤多甙对CIA模型的作用研究

材料和方法

1材料

2方法

实验结果

讨论

第三部分 雷公藤多甙对AA模型的作用研究

材料和方法

1材料

2方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

致谢

附图