银屑病中医证治规律的数据挖掘分析及其常见证候的差异蛋白研究

摘要

背景：
　　银屑病是一种常见的慢性复发性红斑鳞屑性皮肤病，中医称之为“白疙”、“松皮癣”等。银屑病病因复杂，确切发病机制不明，现有的治疗手段仅能缓解或控制症状而不能防止复发，损容性皮疹给患者的生活质量和心理造成巨大的负面影响，银屑病一直是皮肤科领域的重点研究疾病之一。
　　辨证论治是中医治疗体系的主要特点，中医治疗银屑病已经成为该病临床治疗的重要手段之一。近年来银屑病中医治疗的文献报道逐渐增多，提示中医学在这一领域的研究取得了显著成效，积累了一定的临床经验。但由于本病病机复杂，诸位医家对此病的认识和临床诊治经验亦有不同见解，故存在辨证分型繁杂不统一，遣方用药多样化，疗效评价欠规范等问题，导致治疗经验和疗效难以重复和推广，在一定程度上影响了本病中医优势和特色的发挥，制约了中医临床诊疗规范化和相关科学研究的开展。因此亟需对这些文献资源进行深入挖掘和整理，探讨银屑病中医治疗的辨证和用药规律，并对临床研究文献进行系统分析和评价。
　　辨证是中医治疗的前提和依据，中医证候是疾病发展过程中具有规律性的病理概括，不同证候的现代生物学基础的研究对揭示中医辨证论治的现代科学内涵具有非常重要的意义。经查阅文献和总结之前的研究，我们发现银屑病的辨证论治是通过多靶点、多环节发挥作用的，而目前的证候学物质基础研究多以点研究为主，尚需进行全面系统的证候学生物学机制的研究。
　　目的：
　　1.通过对中医治疗银屑病的临床研究文献进行收集整理和数据挖掘，统计分析中医治疗该病的辨证分型特点、治则治法和用药规律，为中医辨证治疗银屑病的理、法、方、药提供参考，并为相关的中医诊疗和科研提供理论依据;
　　2.系统评价犀角地黄汤加减治疗寻常型银屑病血热证的临床疗效，为中医药治疗银屑病的疗效学研究提供更科学的依据;
　　3.从蛋白质水平初步阐明寻常型银屑病血热证、血瘀证的生物学基础，初步揭示银屑病不同证候形成的蛋白质学基础，为银屑病证候实质和方药干预作用靶点的系统生物学研究奠定基础。
　　方法：
　　1.通过文献检索中文全文数据库，收集银屑病中医辨证论治的临床研究文献，采用中国中医科学院中药所的中医传承辅助平台(V2.5)软件系统，建立中医治疗银屑病临床研究数据库，总结具有规律性与整体趋同性的辨证分型标准，探索其用药规律、核心药物组合以及潜在新方组合。
　　2.计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)(1956-2018)、VIP全文数据库(1989-2018)、万方数据库(1990-2018)和PubMed，EMBASE，Medline，以关键词结合自由词检索，收集所有关于犀角地黄汤为主方加减治疗寻常型银屑病血热证的随机对照实验，采取JADAD评分量表，由2名评价员共同评价纳入研究的质量，并用RevMan5.3进行Meta分析。
　　3.采用可一次性检测507种人类蛋白表达水平的蛋白芯片，检测两种最常见的银屑病证候-血热证、血瘀证各3例及3例健康人对照的血清标本，筛选出代表不同证型的差异蛋白;用ELISA法检测51例临床血清标本，以验证前期筛选出的血热证、血瘀证主要差异蛋白。
　　结果：
　　1.研究纳入文献91篇，其中有效方剂103首，使用中药170味，1185味次。出现频次前三的证型为血热证、血瘀证、血虚风燥证;使用频率超过20次的有17味药物，以清热凉血解毒类药物为主，使用频次前三的药物分别为生地黄、甘草及牡丹皮;药物四气统计中多以寒、温、平性为主，药物五味统计多苦、甘、辛为主，归经以肝、心为主;最常用的4组药对依次为生地黄与牡丹皮、生地黄与赤芍、土茯苓与生地黄、生地黄与甘草。血热证银屑病最常用药对为清热凉血药对，犀角地黄汤为治疗血热证银屑病的主要处方，血瘀证常用活血调经药与破血消癥药药对，血虚风燥证常用补血、清热凉血药对;挖掘得到治疗银屑病的潜在治疗新方共11个，治疗血热证和血瘀证的潜在治疗新方各10个，治疗血虚风燥证的潜在新方3个。
　　2.初检文献336篇，经纳入与排除标准，最终纳入6篇文献。6篇研究中有4项95％CI包含了1，结果无统计学意义;2项研究95％CI不包括1，结果有统计学意义。
　　3.银屑病不同证候之间、疾病与正常对照之间存在着较显著的蛋白表达差异。与血瘀证相比，所有的差异因子在血热证患者血清中均呈下调式表达。分析得出代表血热证证候特点的4种主要差异蛋白:B7-1/CD80，PDGF-AB，MIP-1b，FGF-9;代表血瘀证证候特点的6种主要差异蛋白:Smad1，GRO-a，NCAM-1/CD56，IL-23R，IL-23，TMEFF1/Tomoregulin-1。临床标本Elisa验证的结果显示FGF-9，GRO-a，IL-23，NCAM-1在两种证型之间有显著性差异。
　　结论：
　　1.目前对银屑病的病因认识和中医辨治以血的辨证为中心，同时参合其他辨证方式，整体仍以血热、血瘀、血虚三种证型为主，血热证是最常见的证型，清热凉血为主要治则，药物多选用生地黄、牡丹皮、土茯苓、赤芍这类凉血活血解毒药物，犀角地黄汤为治疗血热证银屑病的主要处方。血瘀证以活血化瘀为主要治则，血虚风燥证以补血、清热凉血为主要治则。
　　2.犀角地黄汤加减治疗寻常型银屑病血热证临床有效，但尚不能证明犀角地黄汤治疗寻常型银屑病血热证的疗效优于西药组，还需经过严格科研设计的大样本、多中心、随机双盲、设立安慰剂的临床试验。
　　3.银屑病常见的两种中医证候-血热证和血瘀证之间存在着较显著的蛋白表达差异。血热证证候特异性差异蛋白主要参与炎症反应、细胞趋化、细胞增殖和分化调节等生物学过程，均表达降低;代表血瘀证的差异蛋白参与细胞增殖的调节，自身免疫反应、炎症反应、中性粒细胞趋化等生物学过程，均呈上调式表达，由此推测不同证候时病体的免疫失衡状态存在一定差异。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

第一部分文献综述

综述一银屑病中医辨证论治概况

综述二银屑病发病机制与治疗的西医学研究进展

第二部分基于文献挖掘的银屑病方药证治规律研究

引言

资料与方法

文献数据的预处理

数据统计分析结果

讨论

参考文献

第三部分犀角地黄汤加减治疗寻常型银屑病血热证疗效的Meta分析

引言

资料与方法

结果

讨论

参考文献

第四部分基于蛋白芯片技术的银屑病血热证、血瘀证生物学基础的研究

引言

实验一：应用蛋白芯片筛选银屑病血热证、血瘀证的主要差异蛋白

1．临床资料

2．实验材料和方法

3．数据分析和统计

4．结果

5．小结

实验二： 银屑病患者血热证和血瘀证主要差异蛋白的临床标本验证

1．临床资料

2．实验材料和方法

3．统计分析方法

4．结果

5．小结

讨论

参考文献

致谢