人胎肝肝实质细胞二维电泳与中医肝脏功能理论探讨

摘要

本研究依次从组织和细胞层面对20周孕龄人胎肝的发育程度和蛋白质信息进行探讨.我们先在组织层次上从形态学角度阐述20周孕龄入胎肝的发育程度,以便对所提取的蛋白质组成成分进行功能分析,所采用的技术手段是HE染色.HE染色是最常用的组织化学染色方法,可以检测组织和细胞基本形态结构,实验结果说明20周孕龄人胎肝组织肝小叶和肝细胞板已基本形成,肝小叶之间可见初级和次级汇管区,肝细胞索呈单行或双行排列,肝窦内充满不成熟的造血细胞.可见20周孕龄人胎肝是处于发育中期的器官.其次,我们对20周孕龄的人胎肝肝实质细胞进行提取和细胞内全部表达的蛋白质进行分离,以了解胎肝细胞内所表达的蛋白质的信息.肝实质细胞提取过程中,肝实质细胞易破碎和纯度较低是研究的瓶颈,我们构建了以冷冻凝集为基础的肝实质细胞提取技术平台,使提取的肝实质细胞的纯度达到95.3﹪.为了分析肝实质细胞内全部蛋白质信息,我们采用了二维电泳技术将肝实质细胞内全部蛋白质进行分离,并通过优化肝实质细胞裂解方法、凝胶制备方法、一向等电聚焦和二向SDS-PAGE凝胶电泳参数及染色方法,取得了较好的二维电泳图谱,二维电泳图谱的重复性达到83﹪.

目录

缩略词对照表

前言

第一部分实验研究

实验一20周孕龄人胎肝组织HE染色

1材料和方法

2结果

3讨论

实验二20周孕龄人胎肝肝实质细胞的提取和鉴定

1材料和方法

2结果

3讨论

实验三20周孕龄人胎肝肝实质细胞蛋白质的提取和二维电泳

1材料和方法

2结果

3讨论

主要参考文献

第二部分中医理论探讨 中医肝脏功能理论探讨

综述 胎肝肝实质细胞的发育及肝干细胞的提取

主要参考文献

致谢

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