三七三醇皂苷对脑缺血后Nogo-A与神经营养因子调控重塑的研究

摘要

目的 三七三醇皂苷在脑梗死后不同恢复时点Nogo-A及BDNF表达及其调控重塑的研究。 方法 选用健康雄性SD大鼠，体重300±20g。采用改良的Longa方法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型，待清醒后进行Longa评分。根据Longa评分及体重行拉丁方设计分组为模型组、三七三醇皂苷组和尼莫地平组。于术后当天开始给药，模型组给予等剂量生理盐水。各组在术后3、7和28天各取5-8只动物，取材前行Longa评分并用数码相机采集舌象图片，然后麻醉采血、4％多聚甲醛灌注固定取脑。置于4％多聚甲醛固定24小时后，常规病理切片，HE染色，观察组织形态变化。用免疫组化法观察Nogo-A、BDNF、酪氨酸激酶受体B、突触素和突触后致密物质-95的表达。同时用ELISA法测定术后不同时点血清白细胞介素-6的含量。 结果 1．各组动物整体状态观察结果： 术后3天Longa评分三七三醇皂苷组和尼莫地平组显著低于自身给药前评分。活动度各组均较差。体重各组均为负增长。舌色分析结果显示，术后3天R、G、B、L值各组均显著低于正常组动物；H值模型组和尼莫地平组显著低于正常组，三七三醇皂苷组和正常组无统计学差异。术后7天Longa分值各组间无统计学差异；三七三醇皂苷组和尼莫地平组动物活动度有明显改善，模型组状态仍然较差；体重只有模型组仍为负增长；舌色分析结果模型组和尼莫地平组R、G、B、L、H值均显著低于正常组，三七三醇皂苷组己接近正常组水平。术后28天，各组动物均无神经功能缺损表现；活动度各组动物均接近正常；体重各组都呈正增长，三七三醇皂苷组增长幅度接近正常组动物；舌色分析结果模型组和尼莫地平组R、G、B、L、H值均显著低于正常组，三七三醇皂苷组与正常组无统计学差异，并且各值均显著高于模型组，有统计学差异。 2．三七三醇皂苷对MCAO大鼠突触素和突触后致密物质-95表达的影响： 脑梗死后3天和7天时SYN和PSD-95表达显著低于正常水平，28天时表达量增多，三七三醇皂苷组和尼莫地平组在各时间点的表达均高于模型组。 3．三七三醇皂苷对MCAO大鼠BDNF和其受体酪氨酸激酶受体B表达的影响： 脑梗死后能诱导BDNF和TrkB的高表达，随时间的推移，这种高表达呈下降趋势，三七三醇皂苷对BDNF和TrkB的高表达有明显的促进作用。 4．三七三醇皂苷对MCAO大鼠Nogo-A表达的影响： 本实验结果显示，模型组Nogo-A的表达随时间的延长呈现先上升后下降的趋势，三七三醇皂苷组和尼莫地平组在各时间点均显著低于同期模型组。 5．三七三醇皂苷对MCAO大鼠血清白细胞介素-6水平的影响： 本实验结果显示：血清IL-6水平在术后迅速升高，随着病程的延长呈下降趋势，三七三醇皂苷组和尼莫地平组在各时间点均显著低于同期模型组。 结论 1．三七三醇皂苷可以改善动物整体状态、减轻神经功能损伤表现(降低Longa分值)、具有部分改善模型组大鼠血瘀舌色表现和活动度的作用。 2．三七三醇皂苷可以促进脑梗死恢复期突触的重塑、重建。 3．三七三醇皂苷可以上调脑梗死恢复期BDNF和TrkB的表达。 4．三七三醇皂苷可以下调脑梗死恢复期Nogo-A的表达。 5．三七三醇皂苷可以降低脑梗死后血清IL-6的水平。 6．三七三醇皂苷在脑血管病恢复阶段，大脑功能重塑、重建中的部分作甩机制可能为：上调BDNF和TrkB的表达，下调Nogo-A的表达，增强SYN和PSD-95的表达以及降低血清IL-6的水平。

目录

论文说明：英文缩略词表

第一部分综述

脑卒中后大脑可塑性研究进展

三七对缺血性脑血管病保护作用研究进展

第二部分实验研究

前言

实验一大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型的制备及其一般状态的动态观察

材料和方法

结果

讨论

参考文献

实验二三七三醇皂苷对MCAO大鼠SYN和PSD-95表达的影响

材料和方法

结果

讨论

参考文献

实验三三七三醇皂苷对MCAO大鼠BDNF和TrkB表达的影响

材料和方法

结果

讨论

参考文献

实验四三七三醇皂苷对MCAO大鼠Nogo-A表达的影响

材料和方法

结果

讨论

参考文献

实验五三七三醇皂苷对MCAO大鼠血清IL-6水平的影响

材料和方法

结果

讨论

参考文献

致谢

个人简历

附图