非小细胞肺癌化疗抗拒相关的染色体异常改变及化疗敏感性相关的蛋白质研究

摘要

目的:应用比较表达组杂交(Comparative Genomic Hybridization,CGH)技术分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织的染色体片段的扩增与缺失,揭示这些异常改变与NSCLC化疗疗效的关系.结论:(1)以石蜡包埋的病理组织进行CGH研究,采用DOP-PCR方法进行扩增、标记,同样可以获得较好的杂交信号.(2)所检测标本中染色体扩增区域明显多于缺失区域,可能与肿瘤增殖活跃有关.(3)本研究病例腺癌占绝大多数,而扩增频率最高19p13.1-13.3、9q12-q22、22q12-q13和Xq区域可作为肺腺癌特异性染色体改变的候选区域.(4)化疗抗拒者肿瘤的染色体变异数明显多于化疗敏感者提示对化疗抗拒的患者更多的遗传学改变,表明耐药基因位点具有多重性多样性的特点,提示耐药机制复杂性的遗传学依据.(5)14p12-p13和19p的扩增与化疗敏感密切相关,目前无相关研究参照.(6)1q12-q22、10q25-q26、5p15.1-p15.3、19q13.2-13.4、20p11.2-p12、21q22和Xp21-p22.1扩增与化疗抗拒密切相关.其中扩增频率最高19q13.2-13.4恰是高表达可引起对铂类药物耐药的基因位点分布集中的区域,对CGH的结果有一定验证作用.上述研究结果从全基因组水平提供了与NSCLC化疗抗拒或敏感性相关的染色体异常改变区段,这为进一步从中筛选、鉴定出一组发挥关键作用的基因,并使之能够最终为临床预测化疗疗效提供帮助奠定了工作基础.目的:观察耐药蛋白BCRP和PCDGF在NSCLC患者和正常人血清及NSCLC组织切片中表达差异,明确BCRP和PCDGF的表达与化疗疗效的关系,探讨这两种耐药蛋白的临床应用价值.结论:(1)PCDGF和BCRP可在非小细胞肺癌患者血清中不同程度表达.(2)BCRP和PCDGF血清中的表达强度与化疗疗效疗效显著相关,提示BCRP高表达对铂类为主的联合方案耐药,PCDGF高表达可能是肿瘤侵袭转移,增殖活跃的指标.肿瘤组织周围间质PCDGF表达可能提示早期复发转移.(3)BCRP和PCDGF临床病理免疫组化检测有望成为预测化疗疗效的指标,二者强阳性表达提示化疗抗拒.(4)BCRP和PCDGF联合检测可能有助于提高检测灵敏度.

目录

资助

英文缩略语

摘要1

英文摘要1

摘要2

英文摘要2

文献综述1比较基因组杂交技术（CGH）在肿瘤研究中的作用

1.CGH基本原理和方法

2 CGH的临床应用

3 CGH方法评价

4 CGH的近期发展

参考文献

第一部分晚期非小细胞肺癌化疗抗拒的CGH方法研究

前言

材料与方法

1 材料

2 常用仪器

3 实验方法

结果

1 CGH实验DNA探针制备结果

2 NSCLC患者病理组织染色体变异情况（一）

2 NSCLC患者病理组织染色体变异情况（二）

3 染色体表达差异与临床特征相关性

讨论

结论

参考文献

文献综述2BCRP和PCDGF的生物学特性研究

第二部分非小细胞肺癌耐药蛋白免疫组织化学检测及化疗敏感性酶联免疫分析预测

前 言

PartⅠBCRP和PCDGF抗体的western-blot检验

材料与方法

结果

PartⅡ非小细胞肺癌化疗敏感性血清ELISA分析

材料与方法

结果

PartⅢ非小细胞肺癌耐药蛋白免疫组织化学检测

材料与方法

结果

讨论

结论

附：文献综述3：晚期非小细胞肺癌的化疗研究现状及展望

致谢