雷公藤药材中生物碱类成分质量研究

摘要

雷公藤是一种常用的中药，具有抗炎、免疫抑制、抗肿瘤、抗生育等明显的生理活性，尤以免疫抑制作用极为显著。活性成分主要是二萜内酯类、生物碱类等，其中生物碱类成分临床治疗类风湿性关节炎的总有效率为100％，显效率为80％，而且毒性小于二萜内酯类化合物。 然而，雷公藤药材目前主要采自野生，药材质量差异较大，严重影响雷公藤制剂的“安全性、有效性、稳定性、可控性”。因此，对雷公藤药材进行系统的质量研究，选择优良种质，为实施规范化栽培化提供依据。 本研究通过采用高效毛细管电泳法、高效液相色谱法和紫外分光光度法分别对三种雷公藤(雷公藤TripterygiumwilfordiiHook、昆明山海棠T.hypoglaucum(Levl.)Hutch和东北雷公藤T.regelliiSpragueetTakeda)中的生物碱单体(雷公藤植碱wilfordsuine、雷公藤新碱wilformine、雷公藤次碱wilforine、雷公藤碱乙wilforgine)和总生物碱成分进行质量研究。 本实验首次建立了分离雷公藤中几种生物碱单体的电泳方法，分别对雷公藤植碱和新碱进行定量分析，但由于雷公藤样品成分复杂，方法适应性不强。本实验首次建立了分离雷公藤中4种生物碱单体的高效液相色谱法。对来自浙江、湖南、福建等省份的雷公藤(包括分布于浙江和福建的海拔300-500m以上的种质，其形态和生长发育特征介于雷公藤和昆明山海棠之间，暂称为中间类型雷公藤)，以及四川、贵州等省的昆明山海棠，以及吉林的东北雷公藤，25个县市居群，共计116个样本进行分析，每个样本分为木质部和韧皮部进行含量测定。 实验发现样本中雷公藤次碱与雷公藤碱乙含量高且较为接近，而雷公藤新碱和雷公藤植碱含量相近且前者略高于后者。木质部中，各生物碱含量范围分别是：雷公藤植碱：0～10.87×10-5g/g、雷公藤新碱0～17.51×10-5g/g、雷公藤碱乙0～62.87×10-5g/g、雷公藤次碱0～45.4×10-5g/g；而在韧皮部中，雷公藤植碱0～101.25×10-5g/g、雷公藤新碱0～143.73×10-5g/g、雷公藤碱乙0～370.11×10-5g/g、雷公藤次碱0～373.78×10-5g/g。 不同类型雷公藤药材中4个生物碱单体含量差异大，从高到低顺序是昆明山海棠、中间类型雷公藤、雷公藤、东北雷公藤。其中东北雷公藤不仅雷公藤甲素含量低，4个生物碱单体含量也很低，因此，东北雷公藤一直较少作为药用类型具有一定合理性。 在综合分析个体间、居群间、部位间4个生物碱单体含量时，发现有些居群以各种因素计算排序后其含量均排在前8位，发现江西萍乡、浙江江山、福建泰宁、云南昆明和湖南新宁(均为中间类型雷公藤和昆明山海棠)为含量突出的居群。另外，同一居群的个体中4个生物碱单体含量间呈正相关性。浙江江山和湖南新宁雷公藤甲素含量也比较高，更值得关注。 韧皮部中，植碱含量最高的是浙江武义居群中100号样本，新碱含量最高的是云南昆明居群中122号样本，碱乙、次碱含量最高的是湖南新宁居群中132号样本；就4个生物碱单体含量之和而言，韧皮部中含量最高的个体是湖南新宁的132号样本，木质部中最高的个体是江西萍乡的193号样本，这些高含量个体，有利于优良种质的选择。 采用UV法对这116个样本进行总生物碱含量分析。发现从药材部位看，一般韧皮部含量是木质部的2～5倍，二者含量变化呈现一致性。含量较高的居群均来自中间类型和昆明山海棠，分别是：江西遂川、安徽黄山、浙江景宁和云南昆明，其次有浙江遂昌、庆元、松阳以及福建泰宁。在同一植株内，药材粗细对总生物碱的含量影响不大。 取自种植于浙江丽水林科所后84个两年生新根样本，其木质部总生物碱的含量呈现明显随季节变化的规律，3月含量最高，6月、9月、12月逐渐下降，12月降为最低；韧皮部的总生物碱含量随季节变化不明显。

目录

前言

第一章文献综述

第二章高效毛细管电泳分析生物碱

第三章高效液相色谱(HPLC)分析生物碱

第四章雷公藤药材总生物碱含量研究

致 谢

作者简历