小鼠黑色素瘤抗独特型抗体的制备及生物活性研究

摘要

目的：制备抗小鼠B16黑色素瘤的抗独特型抗体(Ab2)并进行体外实验和鉴定，探讨通过免疫效应治疗或者预防小鼠B16黑色素瘤的可能性。 方法：分别用gp75多肽和B16细胞作为抗原免疫BALB/c小鼠，通过杂交瘤技术制备抗gp75多肽的单克隆抗体(Ab1)和抗B16细胞的单克隆抗体(Ab1)，用ELISA、WesternBlot、免疫组织化学、免疫细胞化学、细胞免疫荧光染色等方法研究Ab1的特性。Ab1经胃蛋白酶水解制备F(ab’)2片断，F(ab’)2片断偶联载体蛋白KLH后作为抗原免疫BALB/c小鼠，用ELISA方法研究小鼠免疫血清中Ab2的特性。 结果：获得6株能持续、稳定分泌抗gp75多肽单克隆抗体(Ab1)的杂交瘤细胞株，均为IgG1亚类，其中McAbD分泌稳定、特异性强、效价高；获得6株能持续、稳定分泌抗B16细胞单克隆抗体(Ab1)的杂交瘤细胞株，均为IgG2a亚类，其中McAb4分泌稳定、特异性强、效价高。WesternBlot结果显示McAbD识别约75KD的抗原，McAb4识别约95KD的抗原。免疫组织化学等结果表明McAbD和McAb4所识别的抗原均定位于细胞膜和细胞浆。检测Ab1的F(ab’)2片断免疫血清，结果血清中检测到Ab2和Ab3，Ab2与Ag竞争结合Ab1。 结论：Ab1对其抗原有特异亲和性，在小鼠体内能诱发独特型免疫网络级联反应，为进一步研究抗独特型抗体奠定了基础。

目录

前言

摘要

第一部分gp75多肽抗原单克隆抗体的制备及鉴定

第二部分B16细胞单克隆抗体的研制及鉴定

第三部分抗独特型抗体的制备

结论

参考文献

综述 抗独特型抗体在肿瘤免疫治疗中的研究进展

发表文章

致谢