远志提取物促智和神经细胞损伤的保护作用研究

摘要

远志是著名的益智药物，远志药草的命名就集中地体现了益智强记的主要功能，始载《神农本草经》，至今，中医临床实践已近两千年。 本文以远志为研究对象，将生远志根进行了提取分离得到不同远志提取物组分。采用SH-SY5Y细胞株，以过氧化氢诱导的氧化应激损伤模型，通过体外筛选，确定其中的A3部分和B2部分为有效部分。 本文采用了跳台法、水迷宫法两种行为学检测方法，使用计算机动物行为学在线识别检测系统，选择了东莨菪碱和自然衰老小鼠两种动物模型，对远志提取物A3部分和远志提取物B2部分分别进行了益智药效学研究； 实验结果表明，连续口服给予200、100、50mg·kg<'-1>·d<'-1>的远志提取物B2四周，可明显改善15月龄小鼠的参考学习记忆能力，连续口服给予200、100、50mg·kg<'-1>·d<'-1>的远志提取物B2四周，可明显改善17月龄小鼠的工作记忆能力，连续口服给予50、25、12．5 mg·kg<'-1>·<'-1>远志远志提取物A3两周，可明显改善3 mg·kg<'-1>东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠的学习能力。 观察远志提取物B2对自然衰老小鼠脑内MDA含量、SOD酶、MAO-B酶、CAT酶、AchE酶活性和单胺类神经递质含量的影响，研究结果表明远志提取物B2抑制自然衰老小鼠脑内MDA生成、提高SOD酶、CAT酶活性、抑制乙酰胆碱酯酶、MAO-B酶活性和增加单胺类神经递质含量。 在整体动物实验的基础上，采用离体培养SH-SY5Y、PC12细胞及原代培养大鼠皮层神经细胞实验模型，通过形态学观察、MTT自动微量法及乳酸脱氮酶(LDH)活性和NO含量的检测，发现： 远志提取物A3和B2均能促进SH-SY5Y细胞增殖，并能减轻SH-SY5Y细胞谷氨酸和过氧化氢损伤；均能不同程度地促进PC12细胞的增殖，减轻PC12细胞的谷氨酸和Aβ<,25～35>损伤；均能减轻原代培养皮层细胞的谷氨酸和Aβ<,25～35>神经元损伤。这与整体动物实验的结果相一致，其作用机制可能与抑制NMDA受体过度兴奋引起细胞内Ca<'2+>内流、氧化应急损伤和Aβ<,25～35>诱导神经元损伤的神经细胞坏死及凋亡有关。 综上所述，远志提取物可通过以下多种途径而发挥益智作用： 1．综合调节脑内乙酰胆碱能、单胺类神经递质系统； 2．提高CAT、SOD活力，减少自由基形成； 3．减轻H<,2>O<,2>、兴奋性氨基酸(GLU)和Aβ<,25～35>的神经细胞毒性作用，从而抑制神经细胞坏死及凋亡，保护脑结构及其功能正常。

目录

前 言

第一章中药远志的提取分离

第二章远志提取物益智作用药效学研究

第一节远志提取物A3对东茛菪碱致小鼠学习记忆障碍的影响

第二节远志提取物B2对老年小鼠的学习记忆能力的影响

第三章远志提取物改善学习记忆机制的初步探讨

第一节远志提取物B2的抗氧化作用

第二节远志提取物B2对小鼠全脑乙酰胆碱酯酶活性的影响

第三节远志提取物B2对老年小鼠全脑单胺类神经递质含量的影响

第四章远志提取物对神经细胞的增殖及损伤的保护作用

第一节不同组分远志提取物对SH-SY5Y细胞的增殖及损伤的影响

第二节远志提取物A3和B2对SH-SY5Y细胞的增殖及损伤的保护作用

第三节远志提取物A3和B2对PC12细胞的增殖及损伤的保护作用

第四节远志提取物A3和B2对原代培养皮层细胞神经损伤的影响

第五章结论

文献综述部分——中药促智作用的内分泌免疫机制研究进展

附表

致谢

个人简历

附图