免疫磁珠阴性选择法检测非小细胞肺癌患者循环肿瘤细胞

摘要

目的：本研究拟探索一种新方法的可行性，即免疫磁珠阴性选择法富集结合ICC鉴定检测CTC。 材料与方法：选取2007年2月至6月间在北京协和医院胸外科住院手术的肺部占位待查患者作为研究对象，采取术前、术后患者的外周血以及术中切除的肺叶标本血样或肺静脉血样，用免疫磁珠阴性选择法富集CTC，用荧光标记物Anti-CK8/18、Anti-CD45和DAPI鉴定CTC，并用健康志愿者的全血和肺癌细胞系A549细胞进行Spike试验，评价新方法富集CTC的靶细胞回收率，研究改进方法。 结果：共纳入研究对象24名，其中NSCLC患者术前CTC阳性率为5.88％(1/18)，术中阳性率为50％(7/14)，术后阳性率为0，肺部良性病变患者术前、术后CTC阳性率均为0，术中血样发现2例阳性。Spike试验结果显示：该免疫磁珠阴性选择法富集肺癌细胞的敏感性约57.3％；血样中CTC数量不同以及检测前血样储存的时间不同情况下，该方法的检出率无显著差异；在实验开始前加入靶细胞和在与免疫磁珠孵育时加入靶细胞的不同，对于该方法的检出率无显著差异。 结论：免疫磁珠阴性选择法富集结合免疫细胞化学法鉴定检测NSCLC患者血样中的循环肿瘤细胞是可行的方法。免疫磁珠阴性选择法富集肺癌细胞的回收率约为57.3％。血样中CTC数量以及检测前血样储存的时间对免疫磁珠阴性选择法富集肺癌细胞的检出率没有显著影响。目前免疫磁珠阴性选择法富集肺癌细胞的主要不足在于在磁场中分离免疫磁珠过程中造成的目标细胞丢失，因此该富集方法仍有待改进。

目录

摘要

前言

材料与方法

实验结果

讨论

小结

参考文献

综述1：肺癌微转移的诊断与意义

综述2：循环肿瘤细胞检测的意义与外周血循环肿瘤细胞的检测方法

致谢