第一部分：散发性胰岛素瘤中MLH1、MSH2失活导致微卫星不稳定及其临床意义;第二部分：α-internexin在胰腺内分泌肿瘤中的异常表达及其临床意义

摘要

研究目的：散发性胰岛素瘤的分子发病机制未明。目前仍缺乏可靠的用于鉴别胰岛素瘤良恶性的分子标志物。本课题第一部分的研究目的是明确胰岛素瘤是否发生错配修复基因失活，从而导致微卫星不稳定；错配修复基因的异常以及微卫星不稳定是否可用于鉴别该类肿瘤的良恶性和判断预后。
　　 实验方法：用PCR方法检测61例胰岛素瘤的微卫星不稳定，MLH1基因的杂合缺失和启动子甲基化。用变性高效液相色谱分析方法测定外显子突变并DNA测序验证。用免疫组织化学染色方法检测MLH1和MSH2蛋白在肿瘤及瘤旁组织中的表达。分别用单因素和多因素分析方法对实验数据与患者的临床病理学资料进行相关性分析。
　　 实验结果：在58个散发性胰岛素瘤中，MLH1和MSH2蛋白表达下降分别为38％和16％。散发性胰岛素瘤发生MLH1基因启动子高甲基化和基因杂合缺失分别为32％和50％。MLH1基因启动子高甲基化或同时发生启动子高甲基化和基因杂合缺失与蛋白的表达下降显著相关(P值分别为0.041和0.027)。散发性胰岛素瘤中未发现MSH2基因杂合缺失。1/3的散发性胰岛素瘤发生高频的微卫星不稳定，MLH1或MSH2蛋白表达下降与高频的微卫星不稳定显著相关(P=0.006和0.049)。MLH1和MSH2蛋白表达同时下降也与高频的微卫星不稳定显著相关(P=0.004)。
　　 与临床病理相关分析显示，高频的微卫星不稳定、MLH1蛋白表达下降或MLH1和MSH2蛋白表达同时下降与肿瘤良恶性显著相关(P值分别为2.6×10-5、0.008和0.018)。高频的微卫星不稳定、MLH1蛋白表达下降以及同时发生MLH1和MSH2蛋白表达下降均为患者未即时治愈的独立影响因素(P值分别为0.002、0.011和0.030)。
　　 实验结论：在散发性胰岛素瘤中MLH1基因的失活与杂合缺失和基因启动子高甲基化有关。MLHt和MSH2基因的表达下降以及高频的微卫星不稳定可作为鉴别胰岛素瘤的良恶性以及辅助判断患者的预后的分子标志物。错配修复基因的异常可能在胰岛素瘤的发生中起一定的作用。

目录

声明

第一部分 散发性胰岛素瘤中错配修复基因MLH1、MSH2失活导致微卫星不稳定及其临床意义

前言

材料

技术路线

方法

结果

讨论

小结

参考文献

第二部分 α-internexin在胰腺内分泌肿瘤中的异常表达及其临床意义

前言

材料

技术路线

方法

结果

讨论

小结

参考文献

附录

综述 胰腺内分泌肿瘤临床、病理及分子预后指标的研究进展

致谢