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声明
前言
材料与方法
1 材料
1.1 原代细胞和细胞系
1.2 菌株
1.3 质粒
1.4 抗体
1.5 培养基、试剂盒和主要试剂
1.6 主要溶液的配制
1.7 引物序列和siRNA序列
1.8 主要仪器设备
2 实验方法
2.1 质粒的构建
2.2 原代SMC和细胞系的复苏、培养、传代和冻存
2.3 转染和感染
2.4 RT-PCR检测基因的表达量
2.5 Western blotting
2.6 免疫共沉淀
2.7 免疫组织化学
2.8 GST重组蛋白的表达及纯化
2.9 体外泛素化反应
2.10 体内泛素化反应
2.11 荧光素酶活性检测系统
2.12 大鼠胸主动脉病毒感染及血管环舒缩功能的测定
实验结果
1.1 CHIP通过降解心肌素蛋白而抑制其依赖的平滑肌细胞标志基因的表达
1.2 CHIP siRNA增强心肌素依赖的SMC 收缩基因的表达和转录活性
1.3 明确CHIP与心肌素之间的相互作用
1.4 鉴定CHIP与心肌素相互作用的结构域
1.5 CHIP促进心肌素的泛素化和降解
1.6 CHIP泛素化和降解心肌素依赖于其磷酸化
1.7 CHIP抑制了血管平滑肌收缩基因的表达和血管的收缩舒张功能
讨论
小结
参考文献
附录1英文名词及缩写
附录2 发表的文章
附录3 综述:心肌素与心血管疾病的研究进展
附录4 致谢
附录5 个人简历