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前言
1.视紫红质(Rhodopsin)基因突变导致的视网膜色素变性
2.现有的RP模型
3.斑马鱼在制备疾病动物模型时的优势
4.一种卓越的活体报告子——增强型绿色荧光蛋白(EGFP)
5.视杆细胞特异性表达启动子——XOP
材料与方法
1.鱼的养护
2.分子生物学
3.配鱼与胚胎收集
4.制备转基因鱼
5.胚胎/幼鱼孵育与荧光筛选
6.免疫荧光与组织学
7.荧光显微镜观察
结果
1.两种转基因质粒的制备
2.两种“暂时性”转基因斑马鱼的生成
3.两种转基因鱼注射后死亡率及EGFP阳性率情况
4.活体图像采集对转基因幼鱼的筛选
5.冰冻切片法观察转基因鱼眼视网膜外层区域EGFP情况
讨论
1.转基因斑马鱼对研究RP基因治疗的应用价值
2.“暂时性”转基因斑马鱼有望生成“经典的”转基因鱼系
3.为什么选择R135G和G188R这两个突变位点?
4.用斑马鱼制备RP模型的优势
5.1.3-kb XOP生成转基因斑马鱼模型的成本更低
6.转基因斑马鱼生成有待改进的方面
参考文献
文献综述 现有的视网膜色素变性模型
致谢