TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型的建立

摘要

目的：建立TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型。方法：构建pEGFP-TNNT3(R69H)转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pEGFP-TNNT3(R69H)注射入BDF1小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠。用PCR和Soutllem blot方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过RT-PcR及westem blot的方法检测TNNT3基因表达。结果：8只假孕小鼠共移植注射后的胚胎82枚,出生40只子代鼠,经PCR和Soutbem方法检测得到5只转基因阳性小鼠。对其子代小鼠进行RT-PCR、Western blot检测结果显示,TNNT3在转基因小鼠心脏和骨骼肌中表达量明显增多。结论：通过显微注射法使外源基因pEGFP-TNNT3(R69H)在小鼠基因组中整合,成功建立了TNNT3(R69H)突变转基因小鼠模型。