索拉非尼联合顺铂治疗三阴性乳腺癌的实验研究

摘要

三阴性乳腺癌（TNBC）约占新诊断乳腺癌的15％，这类患者发病年龄早，易早期局部复发和远处转移，无病生存时间和总生存时间均短，预后不佳，目前国内外仍缺乏针对这类特殊类型乳腺癌的规范化治疗指南。本课题旨在研究索拉非尼（Sorafenib）联合顺铂（DDP）对TNBC细胞生长的抑制作用，进一步从信号通路、细胞周期和细胞凋亡等方面探讨了Sorafenib联合顺铂（DDP）治疗TNBC的可能机制。
　　 MTT法检测发现单药DDP和Sorafenib在体外对TNBC细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-468、CAL-51和非TNBC细胞株MCF-7的增殖都有一定的抑制作用。与非TNBC细胞MCF-7相比，MDA-MB-468和CAL-51细胞对DDP更为敏感。通过中效原理，证实DDP和Sorafenib联合应用时，在各个细胞株中均为协同效应。DDP联合Sorafenib对各细胞株协同抑制的分子机制主要是通过影响MAPK通路关键蛋白的表达实现的，Western blot检测显示各细胞株均表现为p-ERK和P38蛋白表达水平不同程度的下降以及p-JNK和p-P38蛋白表达水平不同程度的升高。流式细胞术检测发现DDP联合Sorafenib能阻滞各细胞株的细胞周期，使细胞阻滞在G0/G1期，而抑制细胞增殖。Western blot检测在蛋白水平发现CyclinA、CylinB1、CylinD1和CylinE多种细胞周期蛋白明显降低，这可能是细胞周期抑制的原因。DDP联合Sorafenib诱导各细胞株凋亡的机制可能主要是通过抑制Bcl-2蛋白的表达实现的。
　　 本研究的意义在于首次发现Sorafenib联合DDP在体外能协同抑制多种TNBC细胞株的增殖，并初步阐明分子机制，为该方案的临床应用提供了理论依据。

目录

文摘

英文文摘

表索引

图索引

中英文缩略词

第一部分 索拉非尼联合顺铂对人乳腺癌细胞体外增殖的抑制作用及协同效应

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 索拉非尼联合顺铂对人乳腺癌细胞MAPK激酶信号通路关键蛋白的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分 索拉非尼联合顺铂对人乳腺癌细胞凋亡以及细胞周期的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

结论

在读期间发表的文章

文献综述

参考文献

致谢