神经突触核蛋白-γ(SNCG)对肝癌细胞抗微管药物作用效果的影响及其相关机制初探

摘要

原发性肝细胞肝癌(HCC)是中国最常见的恶性肿瘤之一,每年死亡率位居癌症总死亡率的前三位。目前,紫杉醇(PTX)和长春新碱(VCR)等抗微管药物作为一种以微管蛋白为靶点的细胞周期特异性药物,已广泛应用于临床治疗中晚期肝癌的转移和术后复发。然而此类药物对肝癌患者的疗效差别很大,重要原因是肝癌细胞对抗微管药物产生耐药。因此,发现影响抗微管药物作用的细胞内因子具有重要意义。神经突触核蛋白家族成员synuclein-γ(SNCG)在肝癌组织中高表达,而且表达水平同肝癌病理分级呈正相关。SNCG可以抑制细胞有丝分裂检查点的重要激酶BubR1的功能,导致不正常的细胞分裂。因此,SNCG在肝癌细胞中通过抑制有丝分裂检查点正常激活的机制可能降低肝癌细胞对抗微管药物的敏感性,影响抗微管药物的药效。
　　 为了研究SNCG对肝癌细胞抗微管药物作用效果的影响及其分子作用机制,我们采用人肝癌细胞株SMMC-7721和HepG2稳定过表达synuclein-γ(SNCG)模型,在细胞水平检测SNCG作为预测抗微管药物治疗肝癌疗效的分子标志物及其肝癌治疗新靶点的可能性以及意义。SNCG在肝癌组织和肝癌细胞中普遍高表达。实时定量PCR(Real-time RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测均证实构建的SNCG过表达细胞模型中其mRNA和蛋白表达水平显著增加。经PTX或VCR分别处理,其对SNCG过表达肝癌细胞的生长抑制作用明显降低。SNCG过表达能够降低抗微管药物诱导的细胞有丝分裂期阻滞,肝癌细胞SMMC-7721和HepG2对PTX、VCR的药物敏感性显著降低。全基因组表达谱芯片检测结果提示,SNCG能够影响包括细胞周期、细胞骨架调节、细胞迁移及细胞耐药等多条细胞调节通路,与其相关的基因(AREG,EREG,ATF3,MMP2,DUSP5,ALDH3A1,IGFBP1,IFI16)表达变化均受SNCG的影响。
　　 综合实验结果,SNCG在肝癌细胞过表达后可显著降低其对抗微管药物的敏感性,在肝癌化疗中SNCG是潜在的抗微管药物使用的生物标志物。由于SNCG在纺锤体组装检查点通路中扮演关键角色,使其望成为肝癌配合治疗的新靶点。