FDPS、LRP5基因多态性与阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症疗效的相关性研究低磷酸酶血症家系基因突变分析

摘要

第一部分FDPS、LRP5基因多态性与阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症疗效的相关性研究
　　 背景:骨质疏松症已成为一个困扰各国的严重健康问题,作为一种多基因疾病,有关其药物基因组学的研究鲜有报道。
　　 目的:本研究针对我国汉族绝经后骨量减低/骨质疏松症妇女 LRP5 rs3736228及FDPS rs2297480位点进行基因分型,探讨以上两位点多态性在阿仑膦酸钠治疗前后与BMD、骨转换标志物——ALP、CTX及25(OH)D之间的相关性,以明确两位点多态性在我国汉族绝经后骨量减低/骨质疏松症妇女中的分布频率及其对于预测阿仑膦酸钠治疗疗效的价值。同时,对入组人群治疗前25(OH)D水平进行检测,探讨其与BMD及骨转换标志物之间相关性,全面了解来自我国不同纬度患者维生素D的营养状况及其骨代谢状况。
　　 研究方法:将纳入的632例绝经后骨量减少/骨质疏松症妇女随机分入阿仑膦酸钠70mg/2w及70mg/w治疗组,检测患者治疗前后血Ca、P、ALP、CTX、BMD及治疗前25(OH)D水平；分别采用TaqMan荧光探针及限制性片段长度多态性(PCR-RELP)法对LRP5rs3736228及FDPS rs2297480位点进行基因分型,采用统计学软件SPSS15.0进行统计学分析。
　　 结果:1.FDPS rs2297480与基线股骨颈BMD、治疗3月后ALP变化率显著相关(P<0.005)；LRP5 rs3736228则与治疗6、12月后L2-4 BMD变化率显著相关(P值均<0.05)；两位点与治疗12月后ALP变化率均显著相关(P值均<0.05),与CTX变化率相关性不明显。
　　 2.治疗12月后,不同剂量组间ALP、CTX变化率差异显著,但BMD变化率未见明显不同(P>0.05)。
　　 3.本研究中93.5％患者处于25(OH)D缺乏状态；25(OH)D水平与纬度呈显著负相关,与年龄及两SNP位点未见显著相关(P>0.05).
　　 结论:本研究首次在中国人群中发现 FDPS rs2297480与绝经后骨质疏松妇女股骨颈BMD、阿仑膦酸钠治疗后ALP变化率显著相关,与25(OH)D、治疗后CTX及BMD变化率无明显相关；LRP5 rs3736228位点与治疗后L2-4 BMD变化率显著相关,与25(OH)D及治疗后CTX变化率相关性不明显。
　　 第二部分低磷酸酶血症家系基因突变分析
　　 背景:低磷酸酶血症(Hypophosphatasia,HPP)是一种以骨及牙齿矿化障碍、血及骨TNSALP减低为特征的遗传性疾病,国内鲜有对该病基因突变及其遗传学机制的研究报道。
　　 目的:对收治的两个HPP家系进行临床资料分析及ALPL基因突变检测,以发现中国HPP患者的基因突变,探讨HPP致病机制。
　　 方法:针对2例HPP患者的典型临床特点,进行临床资料分析、影像学及实验室检查。同时提取患者及其亲属外周血基因组DNA,针对ALPL基因12个外显子及附近内含子区合成引物,经PCR扩增后,直接测序检测突变。
　　 结果:两例患者血碱性磷酸酶水平显著降低,明显的骨骼异常。患者1存在ALPLc.18delA及c.G407C两种突变。前者所致移码突变使得翻译提前终止,形成截短蛋白,后者导致编码氨基酸由精氨酸变为脯氨酸(R136P)；患者2携带ALPL c.412 ins C和c.A1040C(p.Q347P)两种突变；两例患者的亲属分别为携带一种突变的杂合子。以上突变在正常人的ALPL检测中均未发现,以往研究中也未有报道。
　　 结论:通过对两个HPP家系进行致病基因ALPL的突变检测,发现了ALPL的4种新突变。以上突变分别与两例HPP患者临床表现密切相关。