脑复聪对LPS激活的小胶质细胞合成环氧合酶-2和分泌前列腺素E2作用的实验研究

摘要

[目的]
　　 观察中药脑复聪含药血清对脂多糖激活后的小鼠神经小胶质细胞BV-2的形态、BV-2中COX-2蛋白的表达以及BV-2上清液中PGE2分泌量水平的影响。
　　 [方法]
　　 将体外培养的小鼠神经小胶质细胞BV-2分成:正常对照组、LPS组(终刺激浓度1μg/ml)、高、中、低剂量脑复聪(NFC)含药血清组,培养24h,用倒置相差显微镜观察细胞形态,蛋白印迹方法检测BV-2中COX-2蛋白的表达,酶联免疫吸附法测定培养BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度。
　　 [结果]
　　 1、BV-2细胞的形态:
　　 通过倒置相差显微镜观察:正常组BV-2细胞大约70-80％贴壁良好,胞体呈三角状、杆状或梭状,大约20-30％悬浮；1μg/ml LPS刺激24h后BV-2约有10-20％贴壁,80-90％悬浮,大多数细胞聚集成团,有的胞体变为圆形。NFC高、中、低剂量含药血清组贴壁细胞数量较LPS组增多,对LPS所致的形态变化有一定的恢复作用。
　　 2、BV-2中COX-2蛋白的表达:
　　 采用蛋白印迹方法检测,结果显示:LPS组BV-2中COX-2蛋白含量较正常对照组升高,差异具有统计学意义(P<0.01)；与LPS组相比,NFC含药血清各剂量(高、中、低剂量)组BV-2中COX-2蛋白含量均下降,差异显著(P<0.01)。
　　 3、BV-2上清液中PGE2蛋白的浓度:
　　 采用酶联免疫吸附方法检测BV-2上清液中PGE2含量,结果显示:LPS组较正常对照组BV-2上清液中PGE2含量升高,差异具有统计学意义(P<0.01)；与LPS组相比,NFC各剂量(高、中、低剂量)含药血清组含量均下降,差异显著(P<0.01)。
　　 [结论]
　　 NFC含药血清可以显著下调脂多糖激活后BV-2中COX-2蛋白的表达量并显著减少BV-2上清液中PGE2的分泌量。
　　 [创新点]
　　 体外培养小鼠神经小胶质细胞BV-2,从细胞水平观察中药复方制剂的含药血清对LPS活化的BV-2中COX-2蛋白表达及其上清液中的PGE2的分泌水平的影响,为NFC临床防治神经退行性疾病提供一定的实验依据。