A型肉毒毒素对兔植皮后皮片收缩相关因素影响的研究

摘要

目的: 研究A型肉毒毒素(botulinum toxin type A，BTXA)对兔植皮术后皮片的成活及收缩相关因素:成纤维细胞数量、胶原纤维致密度及肌成纤维细胞标记性蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)的表达有无影响，同一皮片不同部位收缩情况是否相同。 方法: 以预制好的模板，于兔背部沿脊柱两侧对称的用美兰各制备两排共4个2cm×2cm正方形供皮区，切取全厚皮片。此时供皮区形成创面，共20个创面。于每只兔背部随机选取2个创面，每个创面皮下均匀注射BTXA5U，此为S组，共10个创面;其余没注射BTXA的为空白对照D组，每个皮片根据中央区与周围区分为Z组与B组。在同一只兔上，将切取下来的皮片随机逐一植于供皮区的创面上。植皮中央缝合一针于皮下组织用以固定皮片。术后12天，大体观察切口愈合及植皮成活情况。组织学观察组织的HE染色标本中炎症细胞，成纤维细胞，胶原纤维的变化及a-SMA免疫组织化学染色标本中a-SMA表达;测量每张图片a-SMA的积分光密度值。 结果: 大体观察S组与D组切口愈合及皮片成活无明显差异。光镜下实验组较对照组、周围组较中央组，真皮中炎症细胞减少，胶原纤维相对细小、致密度下降，排列较规则，大体走向更一致。成纤维细胞数量减少，较分散。表皮生长，真皮层厚度，小血管及皮肤附属器未见明显差异。S组与D组α-SMA的积分光密度值组间差异有统计学意义(P＜0.01 Pa-SMA=0.003)，S组α-SA的表达较D组明显减少;S组内的α-SMA的积分光密度值Z组与B组间差异有统计学意义(P＜0.01: Pα-SMA=0.000)，SB组α-SMA的表达量较SZ组明显减少;分析结果表明D组内的α-SMA的积分光密度值Z组与B组间差异有统计学意义(P＜0.01:Pα-SMA=0.000)，DB组α-SMA的表达量较DZ组明显减少。 结论: BTXA的注射不影响植皮的正常成活及切口的愈合。可以通过减少收缩过程中的成纤维细胞的数量，减少胶原的合成与沉积及炎症细胞的生成，从而抑制植皮的收缩;还可以通过减少肌成纤维细胞中a-SMA的表达实现抑制植皮的收缩。

目录

摘要

文献综述 BTXA与皮片的二次的收缩

一、植皮的收缩

1、影响二次收缩过程的因素

2、调节收缩的部分相关因素

3、减少收缩的主要方法

二、BTXA对收缩关键因素的影响

前言

实验部分

研究目的

材料

一、实验动物

二、主要试剂

三、主要仪器设备

方法

一、动物模型的建立及实验方法

二、大体观察

三、标本的收集

四、组织学观察

五、主要观察和检测的指标

六、光学显微镜标本的制作、HE染色及α-SMA免疫组化染色

七、统计处理

结果

一、大体观察

二、组织切片观察

三、α-SMA免疫组织化学的积分光密度值

讨论

全文小结

参考文献

附录

致谢

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