甘草总黄酮及甘草查尔酮A对溃疡性结肠炎的治疗作用及其分子机制研究

摘要

甘草(Radix Glycyrrhizae)作为传统中药广泛应用于治疗包括炎症和胃溃疡在内的各种疾病。甘草总黄酮(licorice flavonoids，LFs)是从甘草中分离得到的具有抗炎活性的一组黄酮类物质。目前关于LFs对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)的作用及机制的研究还很不深入。为了探究LFs对UC的治疗作用及其分子机制，应用UC小鼠模型以及AOM/DSS所诱导的肠炎诱导性结肠癌模型，评价了LFs对UC和肠炎诱导性结肠癌模型的防治作用及可能的分子机制。
　　本研究中，4％的乙酸溶液灌肠成功诱导小鼠溃疡性结肠炎。在造模之前10天开始给药，小鼠灌胃给予LFs（100、200、400 mg/kg）和阳性对照药柳氮磺吡啶（sulfasalazine，SASP）(600 mg/kg)，连续10天。结果显示，与UC模型组对比，LFs治疗可以显著降低结肠湿重系数、结肠大体形态和结肠病理评分以及结肠组织MPO活性，并且呈剂量依赖趋势。此外，LFs可以显著降低结肠组织NO含量同时增加结肠组织GSH和SOD含量。Western blot结果显示LFs可以下调NF-κB信号通路并且上调Nrf2通路。LFs治疗UC的作用在DSS诱导UC小鼠模型同样得到验证，进一步研究发现LFs还对AOM/DSS所诱导的肠炎诱导性结肠癌具有拈抗作用。
　　通过高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）鉴定甘草总黄酮样品的主要成分及含量。甘草查尔酮A(Licochalcone A，Lico A)是LFs中最主要的成分，含量达23.21％。近期研究发现Lico A具有显著的抗炎、抗氧化、抗寄生虫以及抗肿瘤等多种药理活性。因此猜测Lico A是LFs中关键抗溃疡的成分之一。用DSS诱导的UC小鼠模型进行验证，结果显示，LicoA能够显著的拮抗DSS诱导的UC，其作用分子机制很可能是通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用和激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用。
　　综上，LFs以及Lico A有可能成为有发展前景的拮抗UC的药物。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

绪论

第一部分 甘草总黄酮对乙酸诱导小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 LFs急性毒性实验

2．2 LFs对小鼠体重的影响

2．3 LFs对小鼠结肠湿重系数的影响

2．4 LFs对小鼠结肠溃疡面积的影响

2．5 LFs对结肠大体形态评分的影响

2．6 LFs对结肠组织病理评分的影响

2．7 LFs对结肠组织髓过氧化物酶(MPO)含量的影响

2．8 LFs对结肠组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量影响

2．9 LFs对结肠组织白介素1β(IL-1β)含量的影响

2．10 LFs对结肠组织白介素6(IL-6)含量的影响

2．11 LFs对结肠组织NF-κB p65、IKKα表达的影响

2．12 LFs对结肠组织一氧化氮(NO)含量的影响

2．13 LFs对结肠组织谷胱甘肽(GSH)含量的影响

2．14 LFs对结肠组织超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响

2．15 LFs对结肠组织Nrf2、Keap 1、HO-1、GCL蛋白表达的影响

3 讨论

第二部分 甘草总黄酮对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 LFs和对小鼠体重和一般体征的影响

2．2 LFs对结肠大体形态评分的影响

2．3 LFs对结肠长度的影响

3 讨论

第三部分 甘草查尔酮A对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的治疗作用

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 Lico A对小鼠一般体征和体重的影响

2．2 Lico A对小鼠结肠长度的影响

2．3 Lico A对小鼠结肠组织病理评分的影响

2．4 Lico A对小鼠结肠组织中MPO含量的影响

2．5 Lico A对结肠组织TNF-α含量的影响

2．6 Lico A对结肠组织IL-1β含量的影响

2．7 Lico A对结肠组织IL-6含量的影响

2．8 Lico A对小鼠结肠组织中NF-κB p65、IKKα、p-IκB蛋白表达的影响

2．9 Lico A对结肠组织NO含量的影响

2．10 Lico A对结肠组织GSH含量影响

2．11 Lico A对结肠组织SOD含量影响

2．12 Lico A对结肠组织Nrf2、Keap 1、HO-1、GCL蛋白表达的影响

3 讨论

第四部分 甘草总黄酮对肠炎诱导性结肠癌的保护作用

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 LFs对小鼠体重的影响

2．2 LFs对小鼠生存情况的影响

2．3 LFs对结肠湿重系数的影响

2．4 LFs对结肠肿瘤个数的影响

2．5 小鼠结肠外观与组织切片

2．6 LFs对小鼠结肠组织TNF-α含量的影响

2．7 LFs对小鼠结肠组织IL-1β含量的影响

2．8 LFs对小鼠结肠组织IL-6含量的影响

2．9 LFs对结肠组织Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

3 讨论

总结与展望

参考文献

综述 甘草黄酮的抗炎、抗氧化作用

致谢

作者简介及发表文章