脑脊液IL10在原发中枢弥漫大B细胞淋巴瘤中的临床价值及调控机制初步探索

摘要

原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)是一类少见的仅累及中枢神经系统的结外非霍奇金淋巴瘤，90％以上的病理类型为弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，而又以激活B细胞亚型为主，占90％以上，其病程凶险，预后差，早期、高效的诊断及病情监测是改善PCNSL患者预后的重要措施。近年来陆续有研究表明PCNSL患者脑脊液IL10水平明显升高，可以高效特异的鉴别诊断PCNSL，优于MRI等影像学检测手段，且可以作为预后评判指标，但目前已有的国内外研究结论报道不一，缺乏临床实用价值，且对脑脊液IL10升高的相关机制研究极少。本研究旨在进一步统计国内PCNSL患者脑脊液IL10的临床数据，分析其在疾病诊断、预后判断及治疗监测等领域可能的应用价值，并初步探索脑脊液IL-10升高的可能机制。
　　目的:探讨脑脊液IL-10对原发中枢弥漫大B细胞淋巴瘤(PCNS-DLBCL)的诊断价值;分析其对患者预后的影响，评价脑脊液IL-10用于治疗后病情监测的可能性;初步探索患者脑脊液IL-10水平升高可能的调控机制。
　　方法:收集北京协和医院2015年4月1日至2017年4月1日共169例患者脑脊液标本，其中PCNS-DLBCL患者31例（CD20阳性，HIV、EBV检测指标阴性），非中枢受累的系统性DLBCL患者57例，其他原发中枢肿瘤45例（包括胶质瘤、脑膜瘤及神经纤维瘤），其他中枢良性疾病（包括自身免疫性疾病及中枢感染）36例。另收集31例PCNS-DLBCL患者脑组织病理石蜡标本。
　　1.收集4组患者脑脊液标本，常规行脑脊液压力、细胞学及蛋白水平检测，采用ECLIA法检测脑脊液IL-10、IL-6细胞因子水平，应用SPSS19.0统计软件分析脑脊液IL-10、IL-6、IL-10/IL-6、脑脊液压力、脑脊液蛋白、脑脊液单个核细胞数量6项指标对PCNS-DLBCL诊断的特异性及敏感性。
　　2.连续随访24例PCNS-DLBCL患者，监测其治疗前后脑脊液IL-10水平，分析其初始水平及治疗后变化对患者预后可能的影响，比较脑脊液IL-10与传统指标在病情监测中的优劣。
　　3.对31例PCNS-DLBCL患者中枢病理组织标本进行IL-10/CD20、IL-10/CD68及IL-10/CD3荧光双染，初步判断IL-10可能的来源细胞，同时进行MYD88、IKK、A20免疫组化染色，运用Image J图像分析软件对染色结果进行半定量分析，探讨IL-10合成分泌中可能参与的信号通路。
　　结果:1.PCNS-DLBCL患者脑脊液IL-10水平及IL-10/IL6比值明显升高(p＜0.001)，以9.85pg/ml作为界值，IL-10诊断PCNS-DLBCL的敏感性和特异性可达87.1％和96.4％，IL-10/IL-6比值以2.72为界值时，敏感性和特异性分别为74.2％和97.8％，IL-10与IL-10/IL-6联合诊断的敏感性和特异性分别为98.9％和97.1％。
　　2.连续监测治疗后24例PCNS-DLBCL患者的脑脊液IL-10水平，中位随访时间14个月（1-24个月），初始治疗前脑脊液IL-10水平与患者PFS、OS无关(p=0.380，p=0.530)，治疗后患者脑脊液IL-10水平明显降低(p=0.009)，2程及4程治疗后患者脑脊液IL-10水平均与患者PFS无关(p＞0.05)，且与同期影像学MRI检查结果不完全一致。
　　3.中枢病理组织荧光双染提示CD20阳性肿瘤细胞与CD68阳性细胞均参与IL-10的合成分泌，CD3阳性细胞胞浆不合成IL-10。免疫组化染色结果显示MYD88阳性率74.29％，半定量结果与脑脊液IL-10水平呈正相关，NFκB信号通路IKK复合物与调节蛋白A20的阳性率分别为68.57％和40％，均与脑脊液IL-10水平无明确相关性。
　　结论:1.脑脊液IL-10单独或联合IL-10/IL-6诊断PCNS-DLBCL均具有极高的敏感性和特异性。
　　2.PCNS-DLBCL患者治疗前脑脊液IL-10水平与预后无关，治疗后脑脊液IL-10水平明显降低，但亦与预后无显著相关，其对病情监测较MRI无明显优势。
　　3.PCNS-DLBCL患者脑脊液IL-10升高可能由肿瘤细胞及肿瘤微环境中CD68阳性巨噬细胞共同参与。MYD88参与了IL-10的调控机制，而NFκB信号通路可能不是影响IL-10合成分泌的主要机制。

目录

中英文缩略表

摘要

前言

第一部分：脑脊液IL-10及IL-10／IL6对原发中枢弥漫大B细胞淋巴瘤的诊断价值研究

一、研究对象

二、临床资料

三、研究方法

四、研究结果

五、讨论

第二部分：脑脊液IL-10对原发中枢弥漫大B患者预后价值及病情监测研究

一、研究对象

二、临床资料

三、研究方法

四、研究结果

五、讨论

第三部分：脑脊液IL-10水平升高的机制初步探索

一、研究对象

二、研究方法

三、研究结果

四、讨论

参考文献

结论

论文综述 IL-10在中枢神经系统疾病中的表达及意义

论文发表情况

致谢

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