丙泊酚通过调节TLR4/ROS/NF--κB信号通路抑制肥大细胞依赖型哮喘小鼠气道炎症的研究

摘要

目的： 哮喘是一种呼吸道慢性炎症疾病，其主要病理特点是气道高反应性伴可逆性气流阻塞，气道粘液分泌增加以及嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T细胞等炎性细胞参与的气道慢性炎症反应。麻醉过程中严重的哮喘发作会引起支气管痉挛，导致通气困难甚至低氧血症，严重威胁到患者的生命安全。丙泊酚是一种广泛应用于临床的静脉麻醉药物其抗炎作用受到广泛关注。在感染或缺血再灌注引起器官炎症损伤的研究中发现丙泊酚的抗炎作用与调节Toll样受体4(toll-like receptor4，TLR4)和核转录因子（nuclear factor-kappaB，NF-κB）相关信号通路，减少细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)减轻氧化应激有关。而丙泊酚对肥大细胞依赖型哮喘有何影响目前尚不清楚。研究表明激活肥大细胞表面的TLR4及其适配子髓样分化因子88（myeloid differentiation factor88，MyD88）后能引起胞内ROS增加，激活NF-κB，最终促进肥大细胞分泌Th2型细胞因子，加重过敏性哮喘。综上所述，本研究拟通过建立肥大细胞依赖型哮喘模型并在哮喘激发阶段使用丙泊酚干预，观察丙泊酚对肥大细胞依赖型哮喘气道炎症的影响;并对TLR4/MyD88/RO S/NF-κB信号通路中相关分子进行检测，进一步探讨丙泊酚减轻肥大细胞依赖型哮喘炎症的机制。 方法： 雌性BALB/c小鼠，6～8周龄，体重20～25g采用随机数字表法随机分为①正常对照组(PBS)：致敏及激发均使用磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline，PBS);②哮喘组(OVA)：小鼠致敏及激发均使用卵清蛋白(ovalbumin，OVA);③丙泊酚处理组(OVA+PPF)：小鼠在OVA激发前30min腹腔注射丙泊酚(propofol，PPF)100mg/kg;④脂肪乳处理组(OVA+LIP)：小鼠在OVA激发前30min腹腔注射脂肪乳(intralipid，LIP)100mg/kg。分别于第1、3、5、7天给予小鼠腹腔注射50ugOVA致敏，并于第22、25、28天进行OVA滴鼻激发哮喘反应。于第29天处死小鼠取肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)用于细胞分类计数及细胞因子检测。取右肺组织用于蛋白质检测，左肺用于组织病理染色。 结果： 与正常对照组相比，哮喘组小鼠BALF中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞都显著增多，细胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-13和TNF-α分泌水平显著升高，支气管周围、血管周围间隙炎症细胞浸润显著增加，炎症评分显著增高，支气管内杯状细胞增生、PAS评分显著增高。丙泊酚处理组与哮喘组相比，BALF中炎症细胞数量、细胞因子水平明显降低，气道炎症评分及PAS评分也明显下降。 与正常对照组相比，哮喘组小鼠肺组织中TLR4和MyD88表达显著增加，H2O2和MDA显著增高，SOD水平明显降低;I-κBα表达明显减少，p-I-κBα及p-NF-κBp65表达明显增多。丙泊酚处理组与哮喘组相比，TLR4和MyD88表达明显下降H2O2和MDA明显减少，SOD水平升高;I-κBα表达明显增多，p-I-κBα及p-NF-κBp65表达明显减少。 结论： 1.丙泊酚可以减轻肥大细胞依赖型哮喘小鼠的气道炎症反应。 2.TLR4/MyD88/ROS/NF-κB信号通路参与肥大细胞依赖型哮喘小鼠的气道炎症反应。 3.丙泊酚抑制TLR4/MyD88/ROS/NF-κB信号通路可能是其减轻肥大细胞依赖型哮喘小鼠气道炎症的机制。

目录

英文缩略词表

基础研究 丙泊酚通过调节TLR4／ROS／NF-κB信号通路抑制肥大细胞依赖型哮喘小鼠气道炎症

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

荟萃分析 胃肠镜检查的镇静中应用呼吸末二氧化碳监测对低氧血症等并发症的影响：系统评价及Meta分析

前言

研究方法

研究结果

讨论

结论

参考文献

综述 Toll样受体在哮喘炎症反应中的作用及研究进展

攻读学位期间发表的论文

致谢

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