TNF--α在LPS诱导小鼠睾丸损伤和附睾炎中的功能

摘要

目的：感染引起的炎症可能会损伤男性生育力。然而，炎症导致生育力损伤的机制尚不清楚。本课题以基因敲除小鼠为模型，探讨脂多糖(lipopolysaccharide)LPS诱导的系统性炎症对男性不育的影响及其导致睾丸和附睾损伤的机理。 方法：以小鼠为模型，用LPS模拟细菌感染。腹腔注射3mg/kg LPS，研究其对睾丸和附睾损伤情况。通过糖原(PAS)染色观察睾丸生精小管分期及睾丸损伤情况;TUNEL染色检测生精细胞凋亡;生物素示踪实验分析睾丸血睾屏障(BTB)结构完整性。通过HE染色观察附睾损伤情况;Masson染色观察附睾纤维化;免疫组化检测附睾炎性细胞浸润。利用qRT-PCR，ELISA检测细胞因子水平及睾酮浓度。 结果：野生型小鼠经腹腔注射LPS早期可显著抑制小鼠睾酮合成并诱导细胞因子TNF-α，IL-6，MCP-1和CXCL10的产生，可破坏BTB通透性并干扰精子发生，诱导睾丸损伤。另外，注射LPS可诱导小鼠附睾炎，主要表现为附睾尾部明显白细胞浸润和管壁纤维化。而TNF-α敲除小鼠注射LPS后并不诱导睾丸和附睾损伤，经腹腔同时注射LPS和TNF-α抑制剂可阻断LPS诱导的睾丸和附睾病理表型。 结论：LPS诱导产生的TNF-α在睾丸损伤中起重要作用，并导致附睾炎。系统性炎症可以通过产生TNF-α损伤生育力，提示抑制TNF-α的产生可能有效预防与治疗感染性炎症导致的男性不育。

目录

摘要

缩略语表

前言

1．睾丸免疫微环境

2．附睾免疫微环境

3．睾丸炎和附睾炎

材料方法

一、实验材料

二、实验方法

实验结果

1．LPS诱导小鼠睾丸功能障碍

2．LPS诱导小鼠附睾损伤

3．LPS诱导的小鼠附睾尾部损伤病理表型鉴定

4．LPS诱导细胞因子的产生

5．TNF-α在LPS诱导的小鼠睾丸功能障碍和小鼠附睾炎中的作用

6．CXCLIO在LPS诱导的小鼠生精细胞凋亡中的作用。

7．LPS诱导产生TNF-α破坏血睾屏障(BTB)通透性

8．TNF-α抑制剂pomalidomide(Pom)可以抑制LPS诱导的睾丸功能障碍和附睾炎

9．LPS是通过系统感染间接影响小鼠睾丸和附睾

讨论

小结

1．腹腔注射LPS可以损伤小鼠睾丸功能

2．LPS可诱导附睾炎

3．TNF-α在LPS诱导的睾丸功能损伤与附睾炎中发挥关键作用

参考文献

文献综述 感染及免疫相关的男性不育

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