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目录
1 前言
2 文献综述
2.1 UCP3可能参与的生理作用
2.1.1 UCP3与适应性生热
2.1.2 UCP3与活性氧（ROS）
2.1.3 UCP3与脂肪酸氧化
2.1.4 UCP3与糖代谢
2.2 影响UCP3表达的因素
2.2.1 禁食对UCP3的影响
2.2.2 高脂饮食对UCP3的影响
2.2.3 运动对UCP3的影响
2.3 UCP3基因表达的调节
2.3.1 过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）
2.3.2 腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）
2.3.3 亮氨酸
3 研究材料与方法
3.1 目的基因重组腺病毒的制备
3.1.1 实验材料
3.1.2 目的基因（UCP3、UCP1、CPT1a、CPT1b）重组腺病毒制备线路图
3.1.3 制备目的基因（UCP3、UCP1、CPT1a、CPT1b）编码区片段
3.1.4 将目的基因连接到Adtrack-CMV载体和Adeasy载体
3.1.5 转染（transfection）
3.1.6 测定重组腺病毒滴度
3.2超表达UCP3和CPT1对脂肪酸氧化、活性氧生成和2-脱氧葡萄糖摄取的影响
3.2.1 主要试剂和仪器
3.2.2 C2C12细胞培养与分化
3.2.3 目的基因重组腺病毒感染C2C12细胞
3.2.4 反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）
3.2.5 Western蛋白免疫印迹
3.2.6 细胞免疫荧光染色
3.2.7 脂肪酸氧化速率测试
3.2.8 测试活性氧生成速率
3.2.9 测试2-脱氧葡萄糖摄取速率
3.2.10 CPT1活性的测试
3.3 脂肪酸、亮氨酸和WY14643、AICAR对UCP3和CPT1a表达的影响
3.3.1 主要试剂与仪器
3.3.2 C2C12细胞培养、分化与干预
3.3.3 实时荧光定量反转录PCR（Real-time RT-PCR）
3.3.4 脂肪酸氧化速率测试
3.4 数据统计
4 结果分析与讨论
4.1超表达UCP3和CPT1对脂肪酸氧化、活性氧生成和2-脱氧葡萄糖摄取的影响
4.1.1 重组腺病毒感染对C2C12肌管细胞UCP3和UCP1表达的影响
4.1.2 重组腺病毒感染对C2C12肌管细胞CPT1表达和活性的影响
4.1.3 UCP3和CPT1超表达对C2C12肌管细胞脂肪酸氧化的影响
4.1.4 UCP1和CPT1超表达对脂肪酸氧化的影响
4.1.5 UCP3和CPT1超表达对C2C12肌管细胞活性氧生成的影响
4.1.6 UC3和CPT1a超表达对C2C12肌管细胞胰岛素敏感性的影响
4.1.7 分析与讨论
4.1.8 小结
4.2 脂肪酸、亮氨酸和WY14643、AICAR对UCP3和CPT1a表达的影响
4.2.1 不同脂肪酸干预对UCP3和CPT1a mRNA表达和脂肪酸氧化的影响
4.2.2 WY14643和亮氨酸干预对UCP3和CPT1a mRNA表达和脂肪酸氧化的影响
4.2.3 AICAR干预对UCP3和CPT1a mRNA表达和脂肪酸氧化速率的影响
4.2.4 分析与讨论
4.2.5 小结
5 结论与建议
5.1 结论
5.2创新点
5.3 建议
致谢
参考文献
附录
个人简历 在读期间发表的学术论文与研究成果
