胡椒碱对MPTP诱导的帕金森小鼠模型的神经保护作用

摘要

目的：
　　帕金森病（PD）是中老年人群中发病率仅次于阿尔兹海默病的常见神经系统退行性疾病，且目前仍然没有有效的治疗方法，关于其发病机制亦有多种学说，其中氧化应激、炎症及凋亡等均是重要的机制之一。胡椒碱为胡椒中主要的药理成分，已被证实具有多种药理作用，是否可用于多巴胺神经元的保护值得探索。本实验旨在探究胡椒碱对帕金森小鼠模型的神经保护作用及其可能的机制，为帕金森病的治疗提供新的治疗思路及实验依据。
　　方法：
　　1、将实验所用C57BL/6小鼠随机分为正常对照组（NS），MPTP组，和胡椒碱治疗组（P+M）。胡椒碱治疗组：灌胃口服小鼠胡椒碱15天(10mg/kg)，其中包括八天的预处理，第9天开始予小鼠连续七天腹腔注射MPTP(30mg/kg)。MPTP组：整个实验过程中用生理盐水代替胡椒碱进行灌胃，第9天开始同胡椒碱治疗组一起进行MPTP腹腔注射。对照组：用生理盐水进行灌胃及腹腔注射，时间及用量同上两组。
　　2、15天后用疲劳转棒实验来观察小鼠的运动协调能力，用水迷宫实验测实小鼠的认知学习能力。
　　3、按要求处死小鼠后，用实剂盒检测小鼠中脑中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的表达情况，用免疫组化方法检测小鼠中脑黑质中TH、IBa-1、IL-1β的相对含量，用免疫印迹法测小鼠中脑黑质IL-1β, Bax和 Bcl-2的水平。
　　结果：
　　1、腹腔注射MPTP可明显减少小鼠黑质多巴胺阳性神经元的数量，
　　2、胡椒碱可以延长帕金森小鼠对疲劳转棒的耐受时间，可以缩短水迷宫空间探索实验的平均潜伏期。
　　3、胡椒碱可以提高氧自由基清除剂SOD表达水平，并抑制脂质过氧化物MDA的表达、可以减少小胶质细胞的活化(IBa-1)和炎症因子（IL-1β）的表达并可以增加Bcl-2/ Bax的比值。
　　结论：
　　1.腹腔注射MPTP可成功制作帕金森小鼠模型。
　　2.胡椒碱可以提高帕金森小鼠的运动协调及认知学习的能力。
　　3.胡椒碱可以通过抗氧化、抗炎、抗凋亡途径对帕金森小鼠起到神经保护作用，减少黑质中多巴胺能神经元的丢失。
　　4.因此，胡椒碱具有成为帕金森保护剂的可能，有进行深入研究的价值。

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引言

材料与方法

1.1实验动物

1.2实验试剂

1.3实验仪器

1.4.实验方法

1.4.1溶液配制

1.4.2 建立帕金森小鼠模型并予胡椒碱干预

1.4.3行为学测实

1.4.4 Morris水迷宫实验

1.4.5小鼠脑组织制备及各项指标的检测

1.4.6 统计学处理

结果

2.1胡椒碱对MPTP诱导的PD小鼠模型的行为学影响结果

2.1.1小鼠爬杆实验测定结果

2.1.2转棒实验测定结果

2.2Morris水迷宫实验结果

2.3小鼠脑组织中各项生化指标的测定结果

2.3.1小鼠中脑黑质多巴胺神经元免疫组化结果

2. 3. 2小鼠脑组织中小胶质细胞免疫组化结果

2.3.3 IL-1β免疫组化及免疫印迹表达水平变化

2.3.4小鼠中脑中SOD活力水平变化

2.3.5小鼠中脑中MDA含量的变化

2.3.6免疫印迹法（western blot）测小鼠中脑中凋亡因子表达水平

讨论

结论

参考文献

致谢

附录A 中英文术语缩略词表

附录B 综述:帕金森病感觉症状的临床特征及治疗

附录C 个人简历及攻读学位期间发表文章情况