七种脂肪酸标准物质的制备及人体血液脂肪酸含量的测定

摘要

脂肪酸在生命历程中是一个非常重要的角色。脂肪酸可以直接调节细胞膜的组成及蛋白质与膜内受体，对人体健康有重要影响。虽然游离脂肪酸只占生命体中所有脂肪酸的一小部分，但他们最为积极的代谢脂质，并通过氧化释放大量的能量供生命体所使用。越来越多的研究表明，许多疾病与游离脂肪酸的浓度变化有密切关系，一些重要的游离脂肪酸(如棕榈油酸等不饱和脂肪酸)含量的异常变化是病情发展的重要依据。因此准确测定人体血液中的脂肪酸组分的含量具有重要的科学意义。
　　 脂肪酸纯度标准物质在脂肪酸的分析检测中具有重要的地位，它是数据可比，可溯源的关键因素之一。高纯度脂肪酸的制备具有较高的技术含量，目前含量在95％以上的制备技术完全被国外公司所垄断，高纯度脂肪酸的制备具有很强的创新性。本文首先采用重结晶的方法成功制得7种脂肪酸标准物质:十三烷酸(C13∶0)，十四烷酸(C14∶0)，十七烷酸(C17∶0)，硬脂酸(C18∶0)，反式油酸(C18∶1)，二十烷酸(C20∶0)和二十二烷酸(C22∶0)，研究了其制备及提纯工艺条件，并用红外光谱(FT-IR)仪，气相色谱质谱联用(GC-MS)仪，核磁共振(NMR)仪对其结构进行了表征，利用电位滴定、气相色谱和灼烧残渣实验方法对所得脂肪酸标准物质精确定值。
　　 本文同时建立了一种快速，准确的样品提取方法，无需衍生化，快速提取样品采用高效液相色谱-质谱联用技术对样品进行分析，测定人体血液中游离脂肪酸含量。并对冠心病病人血液中脂肪酸的含量进行检测，与正常人血液的脂肪酸含量做出对比，找出存在的差异，为此类疾病的预防和诊断及治疗提供重要的作用。
　　 实验结果表明:本文成功制的了七种脂肪酸标准物质，其含量都在99％以上，性质及结构都与脂肪酸标准物质相符合。并对样品提取方法及实验条件的进行了优化，建立了一种快速、准确的定量方法。本方法采用Dole提取法，提取样品直接用HPLC-MS进行分析，无需衍生化，根据脂肪酸标准物质成功定量了人血液中游离脂肪酸含量。并将正常人与冠心病人血液中游离脂肪酸含量作对比，发现正常人与病人的脂肪酸含量确有不同。

目录

声明

学位论文数据集

摘要

第一章 绪论

1．1 前言

1．2 脂肪酸概述

1．2．1 脂肪酸的概念

1．2．2 脂肪酸简介

1．2．3 脂肪酸的功能

1．2．4 脂肪酸的分类

1．3 脂肪酸对人体的作用

1．3．1 脂肪酸对人体的影响

1．3．2 反式脂肪酸对人体的危害

1．4 脂肪酸研究进展

1．4．1 脂肪酸的研究意义

1．4．2 脂肪酸的研究重点和难点

1．5 本论文的立题背景和主要研究内容

1．5．1 脂肪酸的研究背景

1．5．2 主要研究内容

1．5．3 主要创新点

第二章 实验部分

2．1 实验试剂及仪器

2．1．1 实验试剂

2．1．2 实验仪器

2．2 七种脂肪酸标准物质的制备

2．2．1 十三烷酸的制备

2．2．2 十四烷酸的制备

2．2．3 十七烷酸的制备

2．2．4 十八烷酸的制备

2．2．5 反-9-十八碳——稀酸的制备

2．2．6 二十烷酸的制备

2．2．7 二十二烷酸的制备

2．3 样品处理

2．3．1 血清样品处理

2．3．2 标准曲线配制

2．4 实验表征方法

2．4．1 傅里叶变换红外光谱测试(FT-IR)

2．4．2 气相色谱质谱联用测试(GC-MS)

2．4．3 核磁共振(NMR)

2．5 高效液相色谱质谱测定血清中脂肪酸的仪器条件

第三章 七种脂肪酸标准物质性质分析及定值

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 化学计量点法的电位滴定仪参数

3．2．2 气相色谱法测定脂肪酸含量测试条件

3．2．3 灼烧残渣法测定脂肪酸含量测试方法

3．3 结果与讨论

3．3．1 红外光谱分析

3．3．2 核磁分析

3．3．3 质谱分析

3．3．4 电位滴定法测定七种脂肪酸标准物质的含量

3．3．5 气相色谱法测定七种脂肪酸标准物质的含量

3．3．6 灼烧残渣

3．4 本章小结

第四章 高效液相色谱——质谱联用技术测定人体血液中的脂肪酸含量

4．1 引言

4．2 仪器条件的建立

4．3 结果与讨论

4．3．1 流动相的选择优化

4．3．2 提取条件优化

4．3．3 色谱柱的选择

4．3．4 方法线性及检测限

4．3．5 方法回收率及精密度计算

4．3．6 血清样品中脂肪酸含量测定

4．4 本章小结

第五章 结论

参考文献

致谢

研究成果及发表的学术论文

作者和导师简介

北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书