声明
摘要
第一章 绪论
1.1 癌症化疗与细胞多重耐药性
1.2 抗肿瘤多肽
1.2.1 抗肿瘤多肽简介
1.2.2 抗肿瘤多肽的结构特点
1.2.3 抗肿瘤多肽的作用方式
1.3 抗肿瘤多肽与细胞作用的表征手段
1.3.1 抗肿瘤多肽的活性及膜裂解能力表征
1.3.2 细胞凋亡机制的常用检测及表征方法
1.4 抗肿瘤多肽药物的优缺点
1.4.1 抗肿瘤多肽药物的优点
1.4.2 抗肿瘤多肽药物的缺点
1.5 分子自组装
1.6 多肽自组装
1.6.1 多肽自组装的驱动力
1.6.2 环境影响多肽自组装
1.7 多肽自组装性质表征手段
1.7.1 圆二色谱
1.7.2 透射电子显微镜
1.7.3 原子力显徽镜
1.7.4 刚果红染色实验
1.7.5 1,8-ANS结合实验
1.7.6 临界胶束浓度的测定
1.7.7 成胶能力实验
1.8 自组装抗肿瘤多肽的构建
1.8.1 自组装对多肽活性和作用方式的影响
1.8.2 自组装赋予多肽新的功能
1.8.3 抗肿瘤多肽的常见自组装改造方法
1.9 本论文研究目的与意义
1.10 本论文主要研究内容
第二章 抗肿瘤多肽的设计、优化及作用机制研究
2.1 引言
2.2 实验部分
2.2.1 实验仪器
2.2.2 实验试剂
2.2.3 多肽的合成
2.2.4 多肽的质谱鉴定与液相纯化
2.2.5 细胞培养
2.2.6 细胞活性测试
2.2.7 乳酸脱氢酶释放实验
2.2.8 细胞死活染色观察
2.2.9 流式细胞仪检测细胞凋亡
2.2.10 Caspase-3活性测试
2.2.11 Western Blot检测Caspase-3表达
2.2.12 线粒体跨膜电位测定
2.2.13 多肽穿膜现象的观察
2.2.14 多肽导致的膜表面压力变化测试
2.2.15 圆二色谱
2.2.16 细胞内吞机制测定
2.2.17 多肽的血清稳定性测试
2.3 实验结果与讨论
2.3.1 多肽序列的设计
2.3.2 多肽的细胞活性及选择性分析
2.3.3 多肽的作用模式分析
2.3.4 多肽ZXR-1通过作用于线粒体导致细胞渭亡
2.3.5 多肽与脂分子膜的相互作用分析
2.3.6 多肽的血清稳定性
2.4 本章小结
第三章自组装抗肿瘤多肽药物的设计、表征和药物应用研究
3.1 引言
3.2 实验部分
3.2.1 实验仪器及试剂
3.2.2 多肽的合成和纯化
3.2.3 二级结构表征
3.2.4 1,8-ANS表征多肽自组装
3.2.5 多肽临界胶束浓度(CMC)的测定
3.2.6 透射电镜观察
3.2.7 原子力显微镜(AFM)观察
3.2.8 细胞培养及活性测试
3.2.9 多肽破膜情况观察及膜表面压力变化观察
3.2.10 多肽的血清稳定性观察
3.3 结果分析与讨论
3.3.1 多肽设计
3.3.2 多肽自组装性质观察
3.3.3 多肽的生物活性和稳定性
3.4 本章小结
第四章 自组装多肽水凝胶的制备、响应性表征及机制研究
4.1 引言
4.2 实验部分
4.2.1 实验仪器及试剂
4.2.2 多肽的合成及纯化
4.2.3 多肽成胶能力测试
4.2.4 多肽二级结构表征
4.2.5 多肽微观形态表征
4.2.6 多肽水凝胶流变学表征
4.3 结果分析与讨论
4.3.1 两亲多肽分子的序列设计
4.3.2 多肽的分析与鉴定
4.3.3 多肚成胶的pH响应性
4.3.4 多肽成腔的离子响应性
4.3.5 多肽的二级结构表征
4.3.6 多肽的微观形貌观察
4.3.7 胶体的流变学性质表征
4.3. 8 多肽的成胶机理探讨
4.4 本章小结
第五章 总结与展望
参考文献
致谢
研究成果及发表论文
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