苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒GP41与两种宿主蛋白相互作用位点序列突变对病毒复制的影响

目录

声明

摘要

1．1杆状病毒简介

1．1．1杆状病毒的分类

1．1．2杆状病毒的生活周期

1．1．3杆状病毒的基因组成及表达调控

1．2杆状病毒糖蛋白

1．3杆状病毒与宿主间的相互影响

1．4蛋白质相互作用研究方法

1．5本课题研究的目的及意义

2．1．1实验所用菌株

2．1．3载体质粒

2．1．4抗生素，诱导剂及显色底物

2．1．5PCR和测序引物

2．1．6培养基及配方

2．1．7酶，化学试剂及试剂盒

2．1．8常用溶液及配方

2．1．9实验设备

2．1．10质粒和病毒

2．2实验方法和步骤

2．2．1重组质粒构建

2．2．2酵母双杂交阳性克隆回交实验

2．2．3重组Bacmid构建

2．2．4转染-感染实验

2．2．5重组病毒滴度测定

2．2．6qPCR实验

2．2．7被转染细胞的透射电镜检测样品制备

3实验结果

3．3 GP41与宿主蛋白CHCHD2和GARS相互作用位点编码序列突变对AcMNPV复制的影响

3．3．1AcMNPV gp41突变体构建

3．3．2 AcMNPV gp41突变体转染-感染细胞的光镜观察表型

3．3．3AcMNPV gp41突变体在被转染-感染Sf9细胞中产生BV的滴度

3．4AcMNPV gp41敲除及L181/A突变体在被转染细胞中的形态发生

4讨论

参考文献

致谢