Ctla4-Ig和Ido基因在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用

摘要

实验目的采用改进咔曼哒“双套管法”将Wistar大鼠肝脏移至SD大鼠体内，通过质粒将合并基因Ctla4-Ig-Ido准确地导入到SD大鼠，检测相应炎症指标和观察T细胞凋亡情况，探索在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用。　　实验方法Wistar大鼠为供体，SD大鼠为受体；第一组导入组合基因Ctla4-Ig-Ido，第二组导入Ctla4-Ig基因，第三组导入Ido基因，第四组导入不含基因的空白质粒；手术后一周，每组处死3只大鼠，收集下腔静脉血，检测ALT、AST、TBiL、TNF-α、IL-2、T淋巴细胞凋亡情况和大鼠肝脏病理变化。　　实验结果　　预实验组完成手术训练，熟练掌握手术操作步骤。　　实验组空白组大鼠术后炎症指标升高明显，病理变化显著、未见凋亡细胞、RAI评分最高，14天内无1例大鼠存活；第一组大鼠术后炎症指标升高不明显，病理变化不显著、出现凋亡细胞、RAI评分最低。　　实验结论在大鼠中准确引入感兴趣的Ctla4-Ig-Ido基因可以减少各种炎症标志物的产生，减轻肝脏病理反应，延长大鼠术后的存活时间，因此，我们得出结论，导入合并基因Ctla4-Ig-Ido可以使受体SD大鼠减轻免疫排斥反应。

目录

声明

第一部分 通过质粒经门静脉导入Ctla4-Ig和Ido基因到受体SD大鼠

前言

实验材料与方法

1. 材料与试剂

2.实验方法

实验结果

3.1 预实验组结果

3.2 实验组结果

实验讨论

实验结论

参考文献

第二部分观察并研究受体SD鼠排斥反应的作用

实验材料与方法

1. 材料与试剂

2.实验分组及方法

统计学处理

实验结果

1.观察术后14天存活情况

2. 肝功能改变情况

3. 肝脏细胞形态结构改变的病理观察

4. TNF-α、IL-2浓度的检测

5. 大鼠肝脏组织中T淋巴细胞凋亡的检测

6、组合基因Ctla4-Ig-Ido 组鼠体内外周T 细胞动态变化

实验讨论

实验创新

实验结论

不足与展望

参考文献

中英文略缩词表

研究生期间发表文章

致谢