(一)雷丸凝集素的纯化与性质研究(二)小黑麦WoH6-7中抗菌成分的研究

摘要

雷丸(Omphalia lapideacens schroet)经过Tris-HCl缓冲液浸提,硫酸铵分级沉淀,离子交换,卵粘蛋白-Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤,纯化得到纯度为95﹪以上的雷丸凝集素(简称OLL).比活提高45.8倍,活力回收2.5﹪.雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质,分子量为12kD,等电点为7.5,可被半乳糖抑制.具有热稳定性及酸碱(pH1-12)稳定性;2mmol/L氯化锌可使其比活提高4倍;与人血进行凝集反应,其比活可提高4倍.进行圆二光谱测定,α-螺旋、β-折叠含量较高;与半乳糖抑制性反应瞬间内完成,且空间结构变得紧密.进行小黑麦WOH6-7中抗真菌蛋白成分的纯化和鉴定工作.经过冰乙酸浸提,硫酸铵分级沉淀,CM离子交换等步骤,抗真菌成分的比活提高了近百倍.FITC-荧光标记实验显示此抗真菌成分能够与木霉的隔膜相应部位结合.几丁质酶测活动实验显示此成分中含有几丁质酶.

目录

本文名词缩写

第一部分雷丸凝集素的纯化及性质研究

摘要

第一章 前言

第一节凝集素的定义及性质

1.1.1凝集素的定义

1.1.2凝集素的命名

1.1.3凝集素的糖专一性

1.1.4凝集素结构

第二节凝集素的研究历史与现状

1.2.1凝集素的研究历史

1.2.2研究现状

第三节蕈菌凝集素的研究现状

第四节研究材料简介

第二章材料与方法

第一节材料

2.1.1试剂

2.1.2仪器

第二节实验方法

2.2.1凝集素测活方法

2.2.2对雷丸、猪苓、苦豆子进行粗提并检测凝集素活性

2.2.3纯化雷丸凝集素

2.2.4 OLL的性质研究

2.2.5 OLL的圆二色谱测定

第三章结果与讨论

3.1凝集素测活方法

3.2检测雷丸，苦豆子，猪苓等粗提液的蛋白含量与活性结果

3.3 OLL的分离纯化

3.4 OLL性质测定

3.5 圆二色谱

第四章 结论

第五章 参考文献

第二部分小黑麦W6-7中抗菌成份的研究

摘要

第一章 前言

第一节简介小黑麦及其抗性

第二节致病相关蛋白(PR-Protein)

第三节几丁质酶

1.3.1几丁质酶的基因结构

1.3.2植物几丁质酶基因的表达和调控

1.3.3几丁质酶与植物的防卫反应机制

1.3.4几丁质酶在防治植物病原真菌中的应用、展望及存在问题

第二章材料与方法

第一节材料

2.1.1补充试剂

2.1.2补充仪器

第二节方法

2.2.1抗真菌(木霉)活性的测定方法

2.2.2小黑麦WOH6-7中抗菌成分的纯化

2.2.3各层析组分中几丁质酶活性的测定

2.2.4利用荧光标记研究抗菌成分

第三章结果与讨论

3.1抗真菌活性的测定方法

3.2小黑麦WOH6-7中抗菌成分的纯化

3.3几丁质酶活性的测定

3.4利用荧光标记判断活性成份

第四章结论

第五章参考文献

致谢