雷丸凝集素的纯化及理化性质的研究

摘要

雷丸(Omphalia lapidescens Schroet.)经过Tris-HCl缓冲液浸提,硫酸铵分级沉淀,离子交换,卵粘蛋白-Sepharose 4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤,纯化得到纯度为95%以上的雷丸凝集素(简称OLL).比活提高45.8倍,活力回收2.5%.雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质,分子量为12kDa,等电点为7.5,可被半乳糖抑制.具有热稳定性及酸碱(pH1～12)稳定性;2mmol/L氯化锌可使其比活提高4倍;同兔血相比,与人血进行凝集反应,其比活可提高4倍.进行圆二光谱测定,α～螺旋和β-折叠含量较高;与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成,且空间结构变得紧密.