表达抗p185嵌合抗体的工程CHO细胞株的大规模培养和条件优化

摘要

本文通过对几个筛选出来的细胞株进行表达量测定和稳定性测试，最终得到一株稳定高效分泌表达抗p185嵌合抗体的工程CHO细胞株。在此基础之上为了得到足够量的抗体，我们进一步从Flask中放大到4L的滚瓶中进行工程细胞培养，通过对表达量的测定和细胞状态的观察，确立了大规模生产用培养基成分，并优化了滚瓶培养的一些参数，初步建立了大规模生产表达抗体的细胞培养工艺，提高了生产效率。　　本研究还用采不同浓度丁酸钠和丙酸钠对工程CHO细胞进行了处理，通过测定细胞生长曲线，测定抗体表达量，分析细胞周期，检测葡萄糖和乳酸含量，分析了它们对生长代谢和嵌合抗体的表达的影响，为提高抗体表达量做出了有意的摸索。

目录

摘要

第一部分综述

第一章p185的基本结构和功能

1.p185的基本结构

2.p185的基本功能

3.p185诱发细胞癌化的分子基础

4.p185过表达的临床意义

5.抗p185抗体的应用

第二章基因工程抗体及其表达体系

1.基因工程抗体的种类

2.基因工程抗体的特点

3.基因工程抗体的真核细胞表达

第三章工程CHO细胞的大规模培养

1.动物细胞大规模培养条件

2.促蛋白表达策略

参考文献

第二部分工程CHO细胞的大规模表达和条件优化

第一章CHO细胞的滚瓶培养及条件优化

前言

一.材料与方法

二.实验结果

三.讨论

第二章丁酸钠和丙酸钠对工程细胞抗体表达的影响

前言

一.材料和方法

二.实验结果

三.讨论

参考文献

致谢

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