外周血中抗原阴性的HBV感染者肝组织病理改变及组织中HBVDNA表达状态与外周血中HBVM表达模式的相关性研究

摘要

目的:研究外周血中抗原阴性的HBV感染者肝组织病理改变情况，外周血及肝组织中HBV DNA表达情况，探讨肝组织病理改变与组织中HBVDNA的表达状态，以及与血清中HBVM表达模式、HBV DNA表达状态、肝功转氨酶指标及胆红素指标的相关性，为临床上处理隐匿性HBV感染者群体策略的制定提供理论依据。　　方法:1、病例筛选:选取未接种过乙肝疫苗，血清HBsAg和HBeAg阴性，而血清抗-HBc和/或抗-HBe和/或抗-HBs阳性的HBV感染病例200例;2、常规检测肝功、肾功、凝血常规以及影像学检查，并尽可能获取肝组织（其中22例在彩超引导下肝穿刺获取肝组织）;3、血清HBV DNA及肝组织HBV DNA定量检测:采用荧光定量PCR法对血清中HBV DNA及肝组织中HBV DNA进行检测;4、肝组织病理学检测:肝组织标本用石蜡包埋后切片，制备好的病理切片进行HE染色、Masson染色，盲法阅片确定肝组织组织学活动度分级和纤维化程度分期;5、肝组织免疫组化检测:制备好的病理切片用SP法检测肝组织中HBsAg、 HBcAg的表达。　　结果:1、外周血HBV DNA定量检出率情况:200例病例中，外周血HBVDNA定量检测，检出15例，外周血中抗-HBc和/或抗-HBe阳性（抗-HBs阴性）组10例，抗-HBs阳性合并抗-HBc和/或抗-HBe阳性组5例，仅抗-HBs阳性组0例，三组外周血HBV DNA定量阳性率差异有统计学意义(P＜0.05);2、肝组织中HBV DNA定量检测情况:全部22例肝组织中均检测到HBV DNA，肝组织HBV DNA定量1.03+01 IU/g—6.03+06 IU/g，大多数肝组织HBVDNA载量较低，而相应的血清中有4例检测到HBV DNA，肝组织中HBVDNA载量均高于血清中HBV DNA载量;3、22例取得肝组织的HBV感染病例，腹部彩超或CT均未提示肝脏有明显形态学异常改变。4、肝组织病理学检查结果:22例肝组织病例中，无肝组织病理学改变者(A0F0)2例(9.09％)，存在不同程度肝组织病理学改变者20例(90.91％);组织学活动度0级(A0)3例(13.63％)、组织学活动度1级(A1)8例(36.36％)、组织学活动度2级(A2)6例(27.27％)、组织学活动度3级(A3)5例(22.72％);纤维化分期0期(F0)5例(22.72％)、纤维化分期1期(F1)6例(27.27％)、纤维化分期2期(F2)3例(13.63％)、纤维化分期3期(F3)4例(18.18％)、纤维化分期4期(F4)4例(18.18％);5、肝组织中HBsAg、 HBcAg表达情况:22例肝组织中仅有2例HBsAg表达阳性，仅有1例HBcAg表达阳性，表达为棕褐色染色细胞为阳性细胞;6、年龄、性别与肝组织组织学活动度、纤维化程度的相关性:年龄与肝组织组织学活动度无相关性(·s=0.105、P=0.643);年龄与肝组织纤维化程度无相关性(·s=0.189、P=0.399);男女两组肝组织组织学活动度差异比较有统计学意义((f)2=9.728、P=0.021＜0.05)，女性组织学活度1级居多，男性2级居多;男女两组肝组织纤维化程度差异比较无统计学意义（(f)2=3.936、P=0.415）;7、年龄、性别与肝组织HBV DNA载量的相关性:年龄与肝组织HBV DNA载量无相关性（·s=-0.311、P=0.158），男女肝组织HBV DNA载量的差异无统计学意义(z=-0.630、P=0.556);8、不同血清乙肝病毒标志物表达模式与肝组织HBVDNA载量、肝组织病理改变的相关性:外周血中抗-HBs阳性组和抗-HBs阴性组比较，两组肝组织HBV DNA定量高低差异比较无统计学意义(z=-1.624、P=0.134)，两组肝组织组织学活动度差异比较无统计学意义（(f)2=2.632、P=0.452），两组肝组织纤维化程度差异比较无统计学意义（(f)2=2.422、P=0.659）;外周血中抗-HBc和/或抗-HBe阳性组、抗-HBc和抗-HBe阴性组比较，两组肝组织HBV DNA定量高低差异比较无统计学意义(z=-1.508、P=0.154)，两组肝组织组织学活动度差异比较无统计学意义（(f)2=0.951、P=0.813），两组肝组织纤维化程度差异比较无统计学意义（(f)2=4.186、P=0.381）;9、肝组织HBVDNA载量水平与肝组织病理改变的相关性:在不同肝组织HBV DNA定量分组中，肝组织组织学活动度及纤维化程度均与肝组织HBV DNA载量高低无显著相关性(P＞0.05);10、外周血中肝功酶学指标及胆红素指标与肝组织病理改变的相关性:不同ALT分组中，肝组织组织学活动度及肝组织纤维化程度均与ALT变化无显著相关性(P＞0.05);不同TBIL分组中，肝组织组织学活动度及肝组织纤维化程度均与TBIL变化无显著相关性(P＞0.05)。　　结论:外周血中抗原阴性的HBV感染者部分人血清中仍可检测出HBVDNA，在血清抗-HBc和抗-HBe未消失的HBV感染者中血清HBV DNA检出率高;外周血中抗原阴性的HBV感染者，无论是否出现了血清抗-HBs以及血清中抗-HBc和抗-HBe是否消失，肝组织中仍可检测出HBVDNA，仍可能存在肝组织学的改变;外周血中抗原阴性的HBV感染者肝组织病理改变与肝组织中HBVDNA定量、肝组织HBsAg和HBcAg的表达状态、血清乙肝病毒标志物表达模式、血清HBVDNA定量、主要肝功指标之间无明确相关性，血清学检查不能完全真实的反应肝脏的实际病变程度;对于外周血中抗原阴性的HBV感染者，不能仅仅依靠血清学、声像学、影像学等检查结果作出判定，还需要积极的进行肝组织活检，以便更准确的判断病情，拟定合理的医学干预方案。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 病例选择

2 主要实验试剂

3 主要实验仪器

4 实验方法

5 统计学方法

结果

1 临床血清学指标检查结果

2 影像学(声像学)检查结果

3 肝组织病理学检查结果

4 肝组织中HBsAg表达情况

5 肝组织中HBcAg表达情况

6 肝组织中HBV DNA定量检测情况

7 外周血HBV DNA定量检出率的比较

8 年龄、性别与肝组织组织学活动度、纤维化程度的相关性

9 不同血清乙肝病毒标志物表达模式肝组织HBV DNA定量的比较

10 年龄、性别与肝组织HBV DNA载量高低的相关性

11 不同血清病毒标志物表达模式肝组织病理改变的比较

12 不同肝组织HBV DNA水平的肝组织病理改变比较

13 外周血中不同肝功酶学指标的肝组织病理改变比较

14 外周血中不同肝功胆红素指标的肝组织病理改变比较

15 不同肝组织病理改变与肝组织HBV DNA定量高低的相关性

讨论

1 血清HBV DNA定量检测及其与外周血乙肝病毒标志物表达模式的相关性

2 肝组织HBV DNA定量检测及其与外周血乙肝病毒标志物表达模式、年龄、性别的相关性

3 外周血抗原阴性的HBV感染者肝组织病理改变

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

乙肝病毒感染者肝组织病理改变与病毒标志物表达模式的相关性研究 综述

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