ASPP在猕猴胚胎干细胞诱导神经分化过程中的表达变化分析

摘要

ASPP蛋白家族由ASPP1、ASPP2和iASPP组成，该蛋白家族在进化上保守，其中最保守的是iASPP，作为p53的抑制因子它在线虫体细胞中也有同源物。ASPP1和ASPP2的功能与iASPP恰好相反，是p53的激活因子。ASPP蛋白家族主要通过调节p53来调节细胞凋亡，同时也调节p53蛋白家族另外两个成员，即p63和p73。最近发现p63和p73在神经系统发育过程过程中发挥着重要作用，且ASPP2缺失小鼠神经系统发育也存在异常。 为检测在灵长类神经系统发育过程中ASPP家族是否有变化，本研究用体外诱导猕猴胚胎干细胞(rESCs)向神经元分化的方法模拟中枢神经系统早期发育的过程，在此基础上检测ASPP家族三个成员在神经细胞分化过程中的表达变化情况。同时，为了更高效快速地诱导分化rESCs向神经前体细胞分化，改良了单层贴壁诱导分化的方法。 研究结果表明改良后的单层贴壁诱导方法能够成功诱导出较高比例的神经前体细胞，满足模拟神经细胞分化过程的要求。在此基础上，检测到ASPP蛋白家族的成员在此过程中都有变化，ASPP1和ASPP2在蛋白表达量上的变化和iASPP在蛋白质翻译后修饰上变化尤为明显。这说明ASPP蛋白家族随着神经细胞分化而被诱导发生了改变，也表明ASPP家族在中枢神经系统发育过程中扮演着重要的角色，为进一步研究其在神经系统发育中的作用奠定了基础。

目录

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声明

第一章绪论

1.1引言

1.2 ASPP肿瘤调控蛋白家族结构与功能的研究进展

1.2.1 ASPP蛋白家族的发现和证实

1.2.2 ASPP的表达及功能

1.2.3 ASPP蛋白家族的进化

1.2.4 ASPP蛋白家族与癌症

1.3灵长类胚胎干细胞向神经前体细胞分化的研究进展

1.3.1 ESCs的基本定义及特征

1.3.2 ESCs向神经细胞定向分化的诱导方法

1.3.3几种典型的神经分化细胞类型

1.3.4胚胎干细胞神经诱导过程中的几种调节通路的探讨：

1.4 ASPP蛋白家族及p53家族在生物神经发育方面的研究进展

第二章体外诱导猕猴胚胎干细胞向神经前体细胞分化

2.1引言

2.2实验材料和方法

2.2.1实验材料及试剂

2.2.2实验方法

2.3结果

2.3.1诱导rESCs向神经前体细胞分化的鉴定

2.3.2诱导rESCs经神经前体细胞向神经元细胞分化

2.4讨论

第三章ASPP蛋白家族在神经分化过程中的变化

3.1引言

3.2实验材料和方法

3.2.1实验材料及试剂

3.2.2实验方法

3.3结果

3.3.1 ASPP1和ASPP2在神经分化过程中的表达

3.3.2 iASPP在神经分化过程中的翻译后修饰

3.4讨论

第四章结论

参考文献

致谢

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