声明
摘要
中英文缩写对照表
第一章引言
1．1肺癌的治疗现状
1．2Neddylation修饰过程
1．3DCN1抑制剂的研究现状
1．4开发LSDl抑制剂是治疗非小细胞肺癌的有效治疗策略
1．5p21在调控细胞周期中发挥重要作用
1．6本课题的研究思路及意义
第二章WS-384靶向抑制LSD1和DCN1-UBC12蛋白-蛋白相互作用的研究
2．1实验材料
2．1．1实验细胞株
2．1．2主要试剂
2．1．3主要仪器
2．1．4溶液的配制
2．2实验方法
2．2．1细胞培养
2．2．2细胞活力的测定
2．2．3细胞克隆形成实验
2．2．4Edu细胞增殖实验
2．2．5细胞凋亡实验
2．2．6细胞周期实验
2．2．7ROS检测实验
2．2．8单细胞凝胶电泳实验
2．2．9Transwell实验
2．2．10细胞总RNA的提取
2．2．11cDNA的合成
2．2．12荧光实时定量PCR(RT-PCR)
2．2．13细胞蛋白的提取
2．2．14Western Blot实验
2．2．15细胞热位移分析
2．2．16siRNA转染
2．2．17数据分析
2．3实验结果
2．3．2WS-384抑制非小细胞肺癌的细胞增殖
2．3．3 WS-384抑制NSCLC中cullin1和cullin3的neddylation并造成下游底物的积累
2．3．4WS-384抑制NSCLC中LSD1的活性并抑制细胞迁移
2．3．5WS-384促进p21蛋白和基因的表达
2．3．6WS-384在NSCLC中以剂量依赖的方式产生细胞周期阻滞
2．3．7WS-384在NSCLC中以剂量依赖的方式诱导DNA损伤
2．3．8WS-384在NSCLC中以剂量依赖的方式诱导细胞凋亡
2．3．9转染siRNA后LSD1和DCN1的表达降低
2．3．10敲低DCN1和LSD1对细胞增殖和凋亡的影响
2．3．11敲低DCN1和LSD1促进DNA损伤
2．4讨论
2．5小结
第三章WS-384在裸鼠体内抗非小细胞肺癌的效果及机制研究
3．1实验材料
3．1．1实验动物
3．1．2实验试剂
3．1．3实验仪器
3．1．4溶液的配制
3．2实验方法
3．2．1细胞的培养
3．2．2裸鼠移植瘤实验
3．2．3肝肾损伤的检测
3．2．4组织蛋白的提取
3．2．6HE染色
3．2．7计算公式
3．2．8数据分析
3．3实验结果
3．3．1WS-384抑制裸鼠体内移植瘤的生长
3．3．2WS-384体内毒性的初步评价
3．3．3WS-384抗肿瘤体内机制的研究
3．4讨论
3．5小结
结论
参考文献
个人简历及在学期间发表的学术论文与研究成果
致谢
郑州大学;
