IL-6/STAT3、IL-2/STAT5信号通路在儿童过敏性紫癜Th17/Treg细胞失衡中的作用

摘要

目的:本研究旨在1）探讨Th17细胞/CD4+CD25+调节性T细胞(regulatoryT cell，Treg)失衡在儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonleinpurpura，HSP)发病机制中的作用;2）探讨IL-6/STAT3（信号转导和转录激活子3，STAT3）、IL-2/STAT5(信号转导和转录激活子5，STAT5)信号通路对Th17/Treg细胞失衡的调节作用;3）探讨血清细胞因子IL-17A、IL-6、TGF-β1、IL-2在HSP急性期的变化及其对Th17/Treg细胞失衡影响的可能机制;4）为进一步阐明Th17/Treg细胞失衡的分子机制之一提供实验依据。　　方法:研究对象为2013年3月-2014年4月我院儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿50例，以及同期来我院体检的健康儿童50例作为对照组。用流式细胞技术检测外周血T淋巴细胞中Th17细胞和Treg细胞的表达水平，用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMC)STAT3mRNA、STAT5mRNA的表达水平;用双抗体夹心ABC-ELISA技术检测血清IL-17A、IL-6、TGF-β1、IL-2的浓度。结果:HSP组外周血T淋巴细胞中Th17细胞水平(3.34±0.60％)较对照组(0.90±0.28％)明显增高(P＜0.01)，而Treg细胞水平(4.21±1.25)较对照组(6.90±1.23)则明显降低(P＜0.01);HSP组STAT3mRNA的相对表达水平为1.92±0.61较对照组1.28±0.63明显增高(P＜0.01)，而STAT5mRNA在HSP组中的表达水平1.23±0.64则明显低于对照组的1.90±0.56(P＜0.01);HSP组血清IL-17A(45.09±12.99pg/ml)、TGF-β1(321.55±81.05pg/ml)、IL-6(83.75±29.91pg/ml)水平较对照组IL-17A(21.80±11.76pg/ml)、TGF-β1(239.84±66.04pg/ml)、IL-6(37.30±12.86pg/ml)水平显著增高，而HSP组血清IL-2(27.61±14.51pg/ml)水平较对照组IL-2(38.51±12.86pg/ml)水平则明显降低(P＜0.01);在HSP组，Th17细胞的表达水平与IL-17A、IL-6、STAT3mRNA的表达水平均呈正相关，相关系数分别为0.945(P＜0.01)、0.864(P＜0.01)、0.912(P＜0.01);Treg细胞的表达水平与IL-2、STAT5mRNA表达水平呈正相关，相关系数分别为0.967(P＜0.01)、0.969(P＜0.01)。结论:HSP急性期的患儿Th17细胞水平增高，Treg细胞水平降低，即存在Th17/Treg细胞失衡;HSP急性期的患儿存在IL-6/STAT3信号通路激活，且Th17细胞的表达水平与IL-6、STAT3mRNA的表达水平均呈正相关，提示IL-6/STAT3信号通路激活参与了HSP发病，Th17细胞增殖、活化与IL-6/STAT3信号通路激活有关，而IL-2/STAT5信号通路活性下调，且Treg细胞的表达水平与IL-2、STAT5 mRNA表达水平呈正相关，提示Treg细胞的表达下调与IL-2/STAT5信号通路活性下调有关。Th17细胞高表达导致过度免疫炎症反应，Treg细胞低表达，其免疫抑制功能不足，两者共同作用最终引起全身广泛性小血管炎可能是HSP重要的发病机制之一;HSP急性期患儿血清IL-17A、IL-6、TGF-β1表达水平上调，IL-2表达水平下调，提示细胞因子IL-17A、IL-6、TGF-β1和IL-2可能通过调节Th17/Treg细胞的失衡参与了HSP的发病，IL-17A、IL-6、TGF-β1和IL-2异常分泌导致细胞因子微环境的改变可能是影响Th17/Treg细胞平衡的一个关键因素;本研究为进一步阐明Th17/Treg细胞失衡的分子机制之一提供了实验依据。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 实验方法

3 统计分析

结果

1 总RNA完整性和纯度的检测

2 cDNA质量的检测

3 HSP组和对照组转录因子STAT3、STAT5 mRNA的相对表达水平

4 细胞因子IL-17A、IL-6、TGF-β1、IL-2的表达水平

5 HSP组和对照组CD3+CD8ˉIL-17A+Th17细胞、CD3+CD4+CD25+Treg细胞的表达水平

6 Th17细胞与STAT3mRNA、IL-17A、IL-6、及Treg细胞与STAT5 mRNA、IL-2的相关性分析

讨论

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

综述

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